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mtt法原理和步骤是什么?
结晶甲瓒( Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在570nm(参比波长630m)波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MT结晶形成的量与活细胞数成正比。参考资料来源:百度百科-MTT法
2024-08-20 网络 更多内容 302 ℃ 834 -
mtt法原理和步骤是什么?
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。(1...
2024-08-20 网络 更多内容 887 ℃ 343 -
mtt实验步骤
mtt实验步骤:1. 胰酶消化对数期细胞,血清中止消化,移液枪吹打至细胞悬浮,细胞悬液1000rpm离心5分钟,弃上清,重悬沉淀制成细胞悬液。细胞计数调整其浓度至5×104/ml(具体细胞密度根据需求适当调整)。2. 将细胞悬液制备好后,轻轻混匀,植入96孔板。推荐每个实验分组设一列(6个复...
2024-08-20 网络 更多内容 949 ℃ 880 -
MTT法的注意事项
MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在00.7 范围内。 MTT一般最好现用现配,过滤后4℃避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在20℃长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避...
2024-08-20 网络 更多内容 877 ℃ 907 -
MTT比色法测细胞活力的步骤
四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝操作步骤一、接种细胞1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。 2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞,计数。 3、将细胞稀释至2.5×10350×103 个/ml,每个微滴定板可容纳20ml细胞重悬液。 4、用加样器...
2024-08-20 网络 更多内容 672 ℃ 679 -
MTT法
#又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。活细胞表现出线粒体脱氢酶活性,可将染料MTT还原为难溶的紫色结晶物沉积在细胞内,经酸性异丙醇溶解后呈现的色度可反映出生活细胞的代谢水平,而死细胞则无此酶活性。
2024-08-20 网络 更多内容 546 ℃ 758 -
MTT法操作步骤
(1)单细胞悬液接种于96孔培养板;103104细胞/孔,每孔培养基总量200微升(96孔培养板每孔容积370微升),37℃、5% CO2培养箱中培养一段时间(根据实验目的决定培养时间) (2)加入2毫克/毫升的MTT液(50微升/孔);继续培养3小时。 (3)吸出孔内培养液后,加入DMSO液(150微升/孔),将培养...
2024-08-20 网络 更多内容 978 ℃ 547 -
MTT比色法测细胞活力的步骤
四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝 操作步骤 一、接种细胞 1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。 2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞,计数。 3、将细胞稀释至2.5×10350×103 个/ml,每个微滴定板可容纳20ml细胞重悬液。 4、用加样器在...
2024-08-20 网络 更多内容 936 ℃ 14 -
mtt实验法注意事项
加药间隔可以查查相关的文献 或是多做几个梯度 去MTT:(因为MTT会形成结晶且易分离,所以拿96孔板是要轻)(所以绝对不可以太用力) 可以用枪头慢慢吸,比如将96孔板倾斜30度,沿着孔壁慢慢洗掉MTT(不要反复倾斜96孔板,那样也容易吸掉结晶的) 个人觉得倒MTT力度太大,暂时没用过 ...
2024-08-20 网络 更多内容 622 ℃ 711 -
悬浮细胞怎么用MTT法
一般做MTT法检测时都需要将细胞置于96孔板内,无论是悬浮还是贴壁都一样,如果是贴壁自然很简单,如果是悬浮的,那么就需要借用一中比较昂贵的仪器,就是板式离心机,一般实验室不具备这种仪器,如果有的话,可以直接将96孔板置于上面离心后,添加MTT试剂参加反应
2024-08-20 网络 更多内容 734 ℃ 28
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