贴壁细胞毒性检测用
贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,, -
养基40ul ；②加Actinomycin D（放线菌素D有毒性）10ul用培养液稀释(储存液100g/ml，需预试寻找最佳稀释度，1:10-1:20)；③需检测物10ul；④细胞悬液50ul（即5×104cell/孔），共100ul加入到96孔板（边缘孔用无菌水填充）。每板设对照（加100l 1640）2: 置37℃，5%CO2孵育16-48小时，..
3）CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；4）CCK-8法的重复性优于MTT 法；5）CCK-8法对细胞毒性小；6）CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。当然，与MTT相比，CCK8有以下2点不足：1）与MTT法相比，CCK8和XTT的价格比较贵。2）CCK8试剂的颜色为淡红色，..
养基40ul ；②加Actinomycin D（放线菌素D有毒性）10ul用培养液稀释(储存液100g/ml，需预试寻找最佳稀释度，1:10-1:20)；③需检测物10ul；④细胞悬液50ul（即5×104cell/孔），共100ul加入到96孔板（边缘孔用无菌水填充）。每板设对照（加100l 1640）2: 置37℃，5%CO2孵育16-48小时，..
3）CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；4）CCK-8法的重复性优于MTT 法；5）CCK-8法对细胞毒性小；6）CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。当然，与MTT相比，CCK8有以下2点不足：1）与MTT法相比，CCK8和XTT的价格比较贵。2）CCK8试剂的颜色为淡红色，..
测定细菌对细胞的毒性试验最好用ldh还是mtt法⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养有帮助请点赞。
MTT 步骤如下：1：接种细胞：用含10％胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000－10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul.2:培养细胞：同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。3：呈色：培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS <ph=7.4>配)20ul.继续是什么。
mtt实验原理 -
药物MTT法实验步骤：贴壁细胞：1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul，铺板使待测细胞调密度1000- 10000 /孔，每次加入细胞的枪头贴着96孔的四周，旋转缓慢加入，加入细胞后可前后左右水平摇晃几下，以让细胞铺板更佳。2. 5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板），加入有帮助请点赞。
注意事项1.由于使用 96 孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96 孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加 P B S，水或培养液，另一方面，可以把96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方，缓解蒸发2.M T T 溶液方黄色需避光保存，长后面会介绍。
有谁知道MTT详细的流程和注意事项啊?谢谢了!!! -
7、同时设置调零孔（培养基、MTT、二甲基亚砜），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜）悬浮细胞：1、收集对数期细胞，调节细胞悬液浓度1×106/ml，按次序将①补足的1640（无血清）培养基40ul ；②加Actinomycin D（有毒性）10ul用培养液稀释(储存液100mg/ml，需预试等会说。
最好分3快板。如果觉得需要孔数少铺在一块板上，检测孔加MTT、DMSO对其他孔细胞有毒性，可能影响测值。而且测试的时候要在细胞房外打开96孔板，可能会污染其他孔细胞。但CCk-8、MTS等对细胞毒性小，有人铺同一块板。测试时注意缩短开盖时间也没有污染。
mtt的MTT用途及原理 -
MTT主要有两个用途：1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；2．细胞增殖及细胞活性测定。MTT原理：检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢（Zā）（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解等会说。
博凌科为解答：贴壁细胞一般在实验前1-2日接入96孔板。太晚，细胞在传代后有一个16小时左右的停滞期，此时代谢变慢，增殖缓慢，此时的MTT数值太低；太早，实验期间，细胞生长过头，此时有死亡和凋亡的细胞，实验时本底又过高，应该寻求的效果是实验时落在细胞对数早中期最好有帮助请点赞。