贴壁细胞传代培养
贴壁细胞怎样进行传代? -
贴壁细胞细胞在培养瓶长成致密单层后，继续生长的空间不足，培养基中的营养成份也消耗较多，同时代谢废物也有较多堆积，需要分瓶培养，对细胞进行传代扩增。对于贴壁不太紧的细胞如293,可以直接吹散后分瓶.而对于贴壁较紧的细胞如CHO,则需要以胰酶消化后再吹散分瓶。将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液到此结束了？。
5. 用75%乙醇消毒培养基瓶外壁，放置到超净台上；6. 将细胞培养瓶取出，用75%乙醇棉球消毒瓶底；7. 用吸管吸弃旧培养基，更换吸管，于非细胞培养面加入等量细胞洗涤液，轻轻摇晃使其覆盖整个瓶底，吸弃细胞洗涤液，更换吸管，重复洗涤一次；8. 加入少量细胞消化液，37℃镜下观察消化；9. 等我继续说。
贴壁细胞细胞在培养瓶长成致密单层后，继续生长的空间不足，培养基中的营养成份也消耗较多，同时代谢废物也有较多堆积，需要分瓶培养，对细胞进行传代扩增。对于贴壁不太紧的细胞如293,可以直接吹散后分瓶.而对于贴壁较紧的细胞如CHO,则需要以胰酶消化后再吹散分瓶。将长成致密单层细胞的细胞瓶中原来的培养液到此结束了？。
5. 用75%乙醇消毒培养基瓶外壁，放置到超净台上；6. 将细胞培养瓶取出，用75%乙醇棉球消毒瓶底；7. 用吸管吸弃旧培养基，更换吸管，于非细胞培养面加入等量细胞洗涤液，轻轻摇晃使其覆盖整个瓶底，吸弃细胞洗涤液，更换吸管，重复洗涤一次；8. 加入少量细胞消化液，37℃镜下观察消化；9. 等我继续说。
一、原理细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。为了保持细胞正常的二倍体核型后面会介绍。
细胞传代：1.贴壁细胞：对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱.PBS清洗2-3次，去除血清和死细胞，50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化，(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶有帮助请点赞。
贴壁细胞和悬浮细胞传代方法上有什么不同 -
贴壁细胞：弃去培养液，加胰酶消化，加培养液终止胰酶作用，吹打成悬液，分装传代。悬浮细胞：离心，弃上清液，加新鲜培养基，分装传代。
姑且认为你说的是贴壁细胞。贴壁细胞培养时一定要等其贴壁之后，并长满培养皿的80%以上，才可以进行传代。不然的话，细胞活力会非常差，基本上传代是不会有活着的了。细胞都是很脆弱的，传代的比例啊，加的培养基的量啊，温度啊，都会影响到它的活力。望采纳有帮助请点赞。
贴壁细胞经胰蛋白酶消化后,分瓶继续培养就是传代培养,其细胞核型不变...
对，因为传代培养十代以内叫传代培养细胞，超过10代细胞生长大部分将停止有一部分继续生长到50代10~50代叫细胞株，超过50代的细胞核型才发生了突变，
悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用离心法后，加入新培养基后再吹打分散进行传代贴壁细胞实验需准备超净台喷洒酒精，紫外照射30min。准备好培养瓶/皿，离心管，10%DMEM，0.25%胰酶，D-hanks液等，带上手套，口罩等，倒去旧培养基，用D-hanks液清洗一遍，去除沉积的死细胞有帮助请点赞。
贴壁细胞和悬浮细胞传代方法上有什么不同? -
贴壁细胞：弃去培养液，加胰酶消化，加培养液终止胰酶作用，吹打成悬液，分装传代。悬浮细胞：离心，弃上清液，加新鲜培养基，分装传代。
可能是胰酶没有预热；也可能是细胞太密集了，或者营养过剩，细胞贴壁过紧！