细胞复苏的步骤
细胞复苏的步骤 -
一、材料培养基,37’C 预热培养瓶装有70 %乙醇的烧杯1ml 、10ml 的移液管、移液器及移液头二、步骤把冻存细胞的管子在37’C 的水浴融化,快速摇动,1分钟内使管内的细胞融化。把融化的管子浸入装有70 %乙醇的烧杯内,整个实验在超净台内进行。小心打开冻存管,不要让乙醇浸入管说完了。
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。加入10mlDMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。二、细等会说。
一、材料培养基,37’C 预热培养瓶装有70 %乙醇的烧杯1ml 、10ml 的移液管、移液器及移液头二、步骤把冻存细胞的管子在37’C 的水浴融化,快速摇动,1分钟内使管内的细胞融化。把融化的管子浸入装有70 %乙醇的烧杯内,整个实验在超净台内进行。小心打开冻存管,不要让乙醇浸入管说完了。
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。加入10mlDMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。二、细等会说。
首先,复苏步骤如下:从液氮取出冻存管,立即放入37℃水浴中融化,约1-1.5分钟后,用酒精消毒后放置在超净工作台上。将细胞悬液转移到装有10ml培养基的15ml离心管中,用培养基清洗冻存管壁,1000转离心5分钟后,弃去上清液,加入1ml培养基使细胞悬浮,然后均匀分布到装有10ml培养基的10cm培养皿中,..
1.\x09把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动.液体都融化后(大概1-1.5分钟)拿出来喷点酒精放到超净工作台里.2.\x09把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来)1000转离心5分钟.3.\x09把上清液倒掉,加1ml培养说完了。
细胞培养及转染Protocol -
(一)材料准备:(二)细胞复苏步骤:1.从液氮或-80℃冰箱容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。2.从37℃水浴中取出冻存管,于超净台中打开盖子,用枪头吸出细胞悬液,加到15ml离心管中(离心管中已预先加入了3ml细胞完全培养基),轻弹混匀。3.离心,1 000 rpm说完了。
细胞复苏是指将冻存在液氮或-80℃的细胞解冻,恢复其生长的过程。操作原则:快!慢冻速融里的速融就是指细胞复苏过程。步骤: 1、准备工作:预热完全培养基。多少℃培养的细胞就预热到多少℃ 在生物安全柜/超净工作台中,准备好细胞培养瓶/皿,并在其中添加足量预热的完全培养基。如果需要离心去除冻存细胞中的等我继续说。
细胞培养(换液/传代/冻存/复苏)操作说明 -
2. 如需换液,参考以下步骤:#160;(1)悬浮细胞:收集培养容器中的所有细胞悬液。250 g离心4 min后弃去上清。使用预热的完全培养基重悬,将细胞悬液接种到合适的培养容器中。#160;(2)贴壁细胞:直接弃去培养容器中的上清,添加预热的完全培养基至原培养容器中。#160;(3)半贴壁细胞:收集后面会介绍。
细胞复苏从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;离心,1000rpm,5min;弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱还有呢?
细胞培养基本方法(复苏、换液、传代、冻存) -
细胞培养1一原代培养(略)2二.传代培养准备及注意事项换液传代冻存复苏MTT3准备事项1.紫外灯照射细胞室30分钟,风机运行10分钟后方可进入实验室.2.穿专用的口罩,帽子,拖鞋,工作衣等.3.带手套,并用酒精擦拭之.4.准备好实验必需用品.5.超净工作台内操作前用酒精棉球擦拭台面.6.超净工作台内操作完成有帮助请点赞。
5.将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心(1000r/min,5min)。6.用培养液悬液混悬沉淀细胞,调整细胞浓度,方培养箱中培养。7.记录复苏日期。【注意事项】1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致希望你能满意。