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测定DNA含量用什么方法

2024-07-16 17:42:32 来源:网络

测定DNA含量用什么方法

DNA制品可用哪几种方法测定其含量,试从原理,准确性方面加以比较_百度...
测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光系希望你能满意。
二苯胺显色法是一种常用的测定DNA含量的方法,其优点在于操作简便、快速、灵敏度高,且结果准确可靠。该方法的原理是DNA在酸性条件下可被溴化钾氧化成脱氧核糖,而脱氧核糖在高温碱性条件下与二苯胺反应生成蓝色化合物,通过测定该蓝色化合物的吸光度可计算出DNA的含量。然而,二苯胺显色法也存在一些缺点。

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测定DNA含量用什么方法? -
紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液可采用荧光光度法。生物帮上面有相关的方法步骤的,无滤芯枪头(灭菌)
测定DNA含量用分光光度计检测法。检测步骤如下:1、预热紫外分光光度计10-20分钟。2、取所需的比色杯,其中一只装入3毫升水溶液,作为空白液,用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。3、DNA含量的测定:取3微升的DNA样品加入比色杯,加蒸馏水至3000微升,混匀;将比色杯置入分光光度计中,调到此结束了?。
求解DNA与RNA含量的测定问题 -
(1)紫外吸收法也就是测量OD(260)和OD(280)的吸收值,这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点,因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收。(2)荧光法,用PicoGreen荧光染料,测定DNA,RNA浓度比较灵敏,并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA,并且受其它杂质的影响不大,缺点要有专门的荧光检测仪器,..
是OD260在0.1到1之间最好。OD260值为1时,双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul,需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒,用多功能酶标仪检测。还有一种就是跑电泳,根据已知浓度条带的亮度对比你提的DNA亮度,这个需要分析软件,肉眼是无法正确比较的。
如何用紫外吸收法测定DNA含量 -
首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算说完了。
方法用大肠杆菌DH5α感受态细胞克隆丰量的pMD-18T重组质粒,紫外分光光度计定量后,根据重组质粒分子量计算其拷贝数,稀释成梯度浓度的荧光实时定量PCR的标准品,取1.0×106、1.0×104和1.0×102拷贝/μl高中低3个浓度的标准品,反复冻融1、6、11、15次和21次后,以冻融后的质粒标准品为模板希望你能满意。
如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量 -
用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA。琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向等会说。
可以先利用已知各浓度的DNA的溶液测出其对应的吸光值,然后做出标准曲线。再测未知液的吸光值,对照标准曲线就可以求出未知液中的DNA浓度。DNA 的最大吸光值在波长260nm处,