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检测PCR条带亮度的软件

2024-07-16 07:22:30 来源:网络

检测PCR条带亮度的软件

求助 谁会用软件分析PCR电泳条带的 我想定量分析一下 -
这个有个很好用的免费软件Image J,是NIH编的,做这个分析最好了可以到这里下载
可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些。同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率。希望对你有帮助。望采纳。

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pcr条带模糊。这是神马情况? -
2. 优化PCR:模板浓度、Mg2+浓度,酶的用量,退火温度增高等;3. 重新设计引物,提高引物特异性。可先在NCBI网站Blast看看引物是不是特异性很强;希望有帮助。祝好运!
给图看看,MARKER清晰吗如果都不清晰的话,那就是电泳系统找找原因如果就是条带不清楚的话,那可能是扩增效率不高,
PCR电泳时maker条带很暗的原因? -
原因可能是缓冲液的问题,也可能是你点样水平太搓了,
一般来说marker是不会有问题的,可能是胶或电泳液的问题,胶没煮好、做的不均匀、电泳液用的时间太长、做胶的电泳液浓度不对都会有影响,
跑PCR后,琼脂糖电泳后显现不出来条带,阳性对照也没有条带,只有maker,跪...
MgSO4和KOD-plus呢?我们这边的体系是33.5ul水,5ul10xKOD-plus Buffer,5ul dNTP,2ulMgSO4,2ul模版,1.5ul引物,1ulKOD-plus
看溴酚蓝的位置在很上面,说明条带分子量很小,电泳电压低,导致样品弥散,条带我怀疑是引物二聚体,而非目的条带。建议先跑touchdown,确定引物能够跑出来,再慢慢摸索具体的温度。
PCR扩出来的条带亮度很弱是什么原因 -
2.首先考虑扩增效率问题,可用touch down PCR,除开头几个循环外,后面的退火温度降低一些,可提高扩增效率;3.如果无效,建议使用两步法,95度1min,(60-65)度3min,可加入touch down 步骤;4.不知道反应体系如何配置,应该是使用了GCbuffer吧?TaKaRa的GCbuffer(尤其是II)的确会降低一些扩增效率有帮助请点赞。
可能是二聚体吧,你可以在电泳旁边加一个MARKER,这样就可以选出目的条带了吧。我PCR扩增的产物也有二聚体产生,比较短的链,一般会在目的条带的前端,很容易看出来的。