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条件性敲除

2024-07-21 02:30:20 来源:网络

条件性敲除

什么是条件性敲除 -
条件性基因敲除是通过把两个LoxP位点插入到目的基因的一个或几个重要外显子的两端以制备出有两个floxed小鼠。该floxed小鼠在与表达Cre重组酶小鼠杂交之前,该基因表达正常;当floxed小鼠与组织特异性表达Cre酶的小鼠进行杂交后,可实现在特定的组织或细胞中敲除该基因,而在其它组织或细胞中该基因表达正常。
完全基因敲除是将基因完全敲除,而条件型基因敲除是按照相应条件来进行基因敲除。基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。需要基因敲后面会介绍。

条件性敲除

什么是完全基因敲除和条件性基因敲除 -
完全基因敲除是把相关基因全部敲出,而条件性基因敲除是按照要求来敲除实验动物的基因。基因敲除和基因嵌入技术是上个世纪90年代出现的最新外源DNA导入技术。基因敲除是基因打靶技术的一种,类似于基因的同源重组。指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,从而代替受体细胞基因组中的相同到此结束了?。
条件性基因敲除小鼠的设计利用了Cre/LoxP或Flipe/Frt原理.它们都是位点特异性重组酶系统.这里以Cre/LoxP系统为例.比如在待敲除的一段目标DNA序列的两端各放置一个loxP序列,得到flox(flanked by loxP)小鼠.将flox小鼠与带有细胞特异性表达Cre的小鼠交配繁殖,以获得在特定细胞里把目标基因敲除掉的小鼠,即希望你能满意。
以cre-loxp系统为例简述什么是条件性基因敲除 -
cre-loxp的条件敲除是系统所开展的组织特异性敲除。基因敲除技术是20世纪80年代发展起来的,是建立在基因同源重组技术基础以及胚胎干细胞技术基础上的一种新分子生物学技术。所谓胚胎干细胞(EmbryonicStem cell,ES)是从着床前胚胎(孕3—5天)分离出的内细胞团(Inner cellmass,ICM)细胞,它具有向各种组织希望你能满意。
基因敲除:又称基因打靶,该技术通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组,进行精确的定点修饰和基因改造,具有专一性强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。条件型基因敲除:例:Cre/LoxP和FLP/FRT 系统所开展的组织特异性敲除。优点:可以防止完全基因敲除导致胚胎死亡。来源:现代分子生物学(第三版等会说。
如何设计条件性基因敲除小鼠模型? -
如果将Cre重组酶cDNA通过基因工程的手段置于组织或细胞特异性启动子之下,可以得到Cre组织/细胞特异性表达的Cre小鼠,也叫Cre工具小鼠。跟Flox小鼠交配之后,可以得到条件性基因敲除小鼠。有需要开展广泛合作的可以咨询赛业生物科技有限公司。赛业生物已服务全球数万名科学家,产品和技术已直接应用于包括CNS(..
条件性敲除可实现基因在特定组织或细胞中的敲除,条件性敲除小鼠是研究基因功能的良好工具。集萃药康条件性敲除小鼠2万元即可获得三只,可以百度了解一下。
条件性基因敲除鼠如何鉴定? -
条件性基因敲除鼠可以通过PCR或基因测序的方式来鉴定。赛业(苏州)生物科技有限公司是赛业生物科技集团2011年在苏州太仓市投资兴建的模式动物生产基地,定位于模式动物的研发与生产。赛业生物在中国设立有赛业苏州公司和赛业广州公司,在北京、上海、武汉、重庆等地均有办事处。目前员工人数达400余名,总规模等会说。
条件性基因敲除小鼠去Neo繁育条件性基因敲除小鼠转为全身性基因敲除繁育F1代杂合(未去Neo或去Neo)flox小鼠(Gene Xflox-Neo/+ or Gene Xflox/+ );与全身表达(Flp或EIIa-Cre)小鼠交配(去除neo基因或指定外显子);与野生型小鼠交配去除(Flp或EIIa-Cre)基因。具体图示请参考附件文件条件性后面会介绍。