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pcr的条件

2024-08-15 16:50:38 来源:网络

pcr的条件

pcr的反应条件是什么 -
PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min.延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓到此结束了?。
PCR反应进行的条件:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效还有呢?

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PCR扩增的反应条件 -
PCR扩增的反应条件:10×扩增缓冲液10ul;4种dNTP混合物各200umol/L;引物各10~100pmol;模板DNA 0.1~2ug;Taq DNA聚合酶2.5u;Mg2+ 1.5mmol/L;加双或三蒸水至100ul。PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,..
正确答案:ABCD
PCR反应条件如何选择及优化? -
PCR技术已经在生物学研究和临床医学检验领域中得到了广泛的应用,PCR技术也日臻完善。PCR技术操作简便,特异性强,敏感度极高,正因为敏感度高,很容易受其他因素的影响,因此要得到准确可靠的反应结果,需根据不同的模板,摸索最适合的条件,配制出PCR反应试剂。聚合酶链反应必须具备下述基本条件:①模板等我继续说。
1、引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。2、酶一般是DNA水解酶和DNA聚合酶,DNA水解酶用于切断磷酸二有帮助请点赞。
下列属于PCR技术的条件的是 -
DNA限制性内切酶。PCR是以DNA半保留复制机制为基础,发展出的体外酶促合成,扩增特定核酸片段的一种方法,DNA复制是模板依赖性的,必须以亲代DNA链作为模板,亲代DNA的两股链解开后,可分别作为模板进行复制。同时DNA复制需要以四种脱氧核糖核苷酸,即dATP,dGTP,dCTP,dTTP,为底物合成子代DNA。
一、温度循环参数在PCR自动热循环中,最关键的因素是变性与退火的温度.如操作范例所示,其变性、退火、延伸的条件是:94℃60s, 37℃60s, 72℃120s,共25~30个循环,扩增片段500bp.在这里,每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算.在自动热循环仪内由混合液原温度变至所要求温度的时间希望你能满意。
PCR技术扩增DNA,需要的条件是 -
【答案】A 【答案解析】试题分析:①目的基因提供模板;②一对引物;③四种脱氧核苷酸作为原料;④热稳定DNA聚合酶从引物开始互补链的合成;答案选A。考点:PCR技术的条件。点评:基础知识考查,基本概念的识记。
pcr的三个步骤如下:1.变性:双链DNA在高温条件下(90~95℃)变成两条单链,作为DNA复制的模板;2.退火:单链DNA在较低温度F(37∼60°C) 与引物互补结合,形成杂交双链结构;3.延伸:升温至70~75℃,结合模板上的引物在耐热DNA聚合酶的催化下按5'→3' 方向延伸,合成模板DNA的互不链。PCR是什么。