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的实验方法

2024-07-15 20:42:51 来源:网络

的实验方法

...细胞的生长具有抑制作用,说明实验原理.方法和可能出现的实验...
1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul.2:培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS <ph=7.4>配)20ul.继续孵育4小时,终止还有呢?
10000/孔是太高了,这样即使药物有作用,MTT方法也是表现不出的,最佳点板浓度在4000-5000/孔,太少的话SD值会很大。对于不同的细胞,每孔细胞数要摸索一下,对照组OD在1.4以下为佳,当然通常来说更不要超过2。⒉MTT本身就是比较粗的实验,增殖率10%左右的波动都不算奇怪。特别是新手,20%的波动也是常见的,所以等会说。

的实验方法

mtt实验步骤 -
mtt实验步骤:1. 胰酶消化对数期细胞,血清中止消化,移液枪吹打至细胞悬浮,细胞悬液1000rpm离心5分钟,弃上清,重悬沉淀制成细胞悬液。细胞计数调整其浓度至5×104/ml(具体细胞密度根据需求适当调整)。2. 将细胞悬液制备好后,轻轻混匀,植入96孔板。推荐每个实验分组设一列(6个复孔),每孔加入希望你能满意。
药物MTT法实验步骤:贴壁细胞:1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度1000- 10000 /孔,每次加入细胞的枪头贴着96孔的四周,旋转缓慢加入,加入细胞后可前后左右水平摇晃几下,以让细胞铺板更佳。2. 5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入等我继续说。
什么是“四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)”? -
测定波长570nm。根据OD值的大小计算反应体系中细胞增殖程度。目前MTT法常用于以下几个方面的研究:1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。2、体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。3、一些细胞因子活性的研究。
一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2O中,等会说。
T细胞增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用方法并简述其原理和特点?_百度...
【答案】:T细胞增殖实验常用3H-TdR掺入法和MTT法。前者是根据3H-TdR能掺入细胞合成的DNA中,细胞增殖水平越高,掺入的3H-TdR越多,细胞培养结束后,用液体闪烁仪测定样品中的放射活性,用于判断细胞的增殖状况。该法灵敏可靠,应用广泛,但需特殊仪器,并有放射性污染。后者是根据细胞增殖时可利用MTT好了吧!
MTT法实验步骤如下:首先,收集对数期细胞,调整浓度至1000-10000个细胞/孔,用100ul细胞悬液铺板于96孔平底板上,边缘孔用无菌PBS填充。细胞在5% CO2和37℃的环境下孵育,直至形成单层细胞。通常在前一天下午铺板,次日上午加药物,建议使用5-7个药物浓度梯度,每孔100ul,并设置3-5个复孔以确保结果到此结束了?。
贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,, -
MTT粉末和溶液保存时都需要避光,用铝箔纸包好就可以。实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光,觉得这样比较好。MTT 步骤如下:1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200ul.2:培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可到此结束了?。
实验设置:包括调零孔、对照孔和加药孔,确保所有条件一致。避免血清干扰:尽量使用低血清浓度的培养液,以保持试验敏感性。接下来是实验步骤的精确执行:MTT溶液的配制通常使用5mg/ml的MTT,称取0.5g溶于100ml PBS中,过滤除菌,冷藏保存。注意配制时容器包裹铝箔纸。MTT的使用和注意事项包括:测定范围、..