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2024-07-16 07:45:52 来源:网络

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贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,, -
用96孔板培养SMMC-7721肝癌做MTT测细胞活力,应该加多少1640培养基,多少MTT和DMSO合适?根据书上说的加200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO 加DMSO之前要尽量去掉培养液,便于DMSO溶解甲臜颗粒进行比色测定一般每孔4000个细胞为宜,既细胞浓度在20000个/ml,MTT加20ul,作用四小时后洗掉上清液,注意不要将甲瓉说完了。
根据书上说的加200ul1640,20ulMTT,150ulDMSO 加DMSO之前要尽量去掉培养液,便于DMSO溶解甲臜颗粒进行比色测定(6) 一般每孔4000个细胞为宜,既细胞浓度在20000个/ml,MTT加20ul,作用四小时后洗掉上清液,注意不要将甲瓉洗掉,然后每孔加150ul DMSO,在脱色摇床上振荡10分钟,然后测吸光值。

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设计一个实验检测某种药物对肿瘤细胞的生长具有抑制作用,说明实验原理...
3:呈色:培养3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS <ph=7.4>配)20ul.继续孵育4小时,终止培养,小心吸弃孔内培养上清液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO,振荡10分钟,使结晶物充分融解。4:比色:选择490nm波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录是什么。
我们悬浮细胞也是用CCK8,加10%的CCK8到体系中后放培养箱0.5h,1h,2h,3h,4h后直接上酶标仪检测即可。至于时间是通过预实验来决定。
MTT实验过程中加DMSO后必须用摇床摇匀10分钟吗?一般摇速为多少比较好...
转速不要太大吧。感觉左右摇摆的摇床比较好,摇十分钟。
置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。镜下观察蓝紫色结晶已溶解就可以测了。不能太晚测,MTT会变质。
MTT法中可以直接加DMSO吗? -
WST-1是MTT的一种升级替代产品。WST-1生成的橙黄色的formazan是溶于水的,因此可以不弃上清。千万别去掉哦,生成的甲瓒就在培养基里,不用加DMSO,直接上酶标仪检测就行了。WST法简单,但是价格要比MTT贵。参考网址on 是什么。
加完DMSO之后MTT并不会很快溶解,需要震荡加速溶解,时间不定。那你需要确定药物的浓度是否过大、药物溶解性、是否可能与MTT有反应等潜在的原因.
MTT法测定细胞活力,在加入DMSO后可以保存一周再检测吗? -
这个不行的,细胞在经药物处理后,再加入MTT,就与细胞发生了反应,一般来说,加入MTT后,要在尽量短的时间内测定出结果才可以的,不然结果就不准确了,曾做过实验对比,放置几天后再测定光吸收值,与首次测定的光吸收值的数据相差很大,已不能准确反应实验情况,建议不要等七次处理完后一起测定是什么。
加完DMSO之后MTT并不会很快溶解,需要震荡加速溶解,时间不定。那你需要确定药物的浓度是否过大、药物溶解性、是否可能与MTT有反应等潜在的原因.