klenow酶是什么酶

klenow酶是什么酶

klenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构上和功能上的主要区别是什么?
Klenow酶是Hans Klenow 1970年用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ时，得到的两个片段中分子量较大的一个，它含有605个氨基酸残基(324～928)，并有大小两个结构域，其中大结构域(518～928)具有5'→3'聚合酶活性，小结构域(324～517)则具有3'→5'外切酶活性。缺少一个5’3‘的外切酶活性，..
Klenow片段是DNA聚合酶的一种，是E.coli聚合酶I的大片断。具有DNA聚合酶I的5'-3'聚合酶活性和3'-5'外切酶活性，但没有的5'-3'外切酶活性。通常DNA聚合酶最广泛的用途是在以DNA为模板，通过PCR扩增获得大量的DNA序列，这种复制通常都是级数放大的。而Klenow片段则只能完成对模板的一次复制，不能实现等我继续说。
简介DNA聚合酶I和Klenow大片断的结构和功能 -
Klenow大片段是用蛋白酶水解DNA聚合酶Ⅰ所得的大片段区域，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性，在基因工程中有广泛的应用，主要有：修复反应、制备平末端；标记DNA 3'突出末端；双脱氧末端终止法进行DNA序列分析；用于cDNA第二链的合成；定点突变中用于合成第二链；用引物延伸法制备单链DNA后面会介绍。
分子量：约68kDa(单体)。活性定义：37℃30分钟时间内，催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。酶活性检测条件：67mM potassium phosphate(pH7.4)，6.7mM MgCl2，1mM 2-mercaptoethanol，0.033mM dATP，0.033mM dTTP，0.4MBq/ml[H]-dTTP，62.5μg/ml等会说。
klenow片段和大肠杆菌dna聚合酶i有何异同 -
II.用于DNA连接后的大缺口填充III.用于DNA的序列分析B.Klenow酶I.补平由核酸内切酶产生的5'粘性末端II.DNA片段的同位素末端标记III.cDNA第二链的形成IV.双脱氧末端终止法（Sanger）法测定DNA序列③仅有DNA聚合酶I能够催化切口平移反应④Klenow酶不能直接用于3'突出末端的DNA的标记到此结束了？。
核糖核酸酶H (RNase H)是一种核糖核酸内切酶，它能够特异性地水解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键，故能分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链。该酶不能消化单链或双链DNA。Klenow片段就是DNA聚合酶I大片段，
Klenow酶的作用是? -
①补平经限制性内切酶消化DNA所形成的3'凹陷末端，包括带裂口的双链DNA的修复；②用³²P dNTP对带3'凹陷末端补平，标记DNA分子3'末端；③在cDNA克隆中，用于cDNA第二链的合成；④用于Sanger双脱氧末端终止法进行DNA序列分析；⑤在单链模板上延伸寡核苷酸引物，以合成杂交探针和进行体外突变后面会介绍。
经过枯草杆菌蛋白酶处理后，酶分子分裂成两个片段，大片段分子量为76KD，通常称为Klenow片段，小片段的分子量为34KD。此酶的模板专一性和底物专一性均较差，它可以用人工合成的RNA作为模板，也可以用核苷酸为底物。在无模板和引物时还可以从头合成同聚物或异聚物。DNAPolⅠ在空间结构上近似球体，直径是什么。

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