SDSPAGE电泳求助专题
SDS-PAGE电泳求助专题 -
SDS-PAGE电泳的基本原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复希望你能满意。
最后说一下条带越跑越宽是必然的,条带最后终归会有部分弥散,就看你需要跑多少大小的蛋白,一般120V恒压65min10%或8%的胶30KDa以上都不会太弥散,如果你确实需要分离小蛋白,请使用glycine-SDS-PAGE,protocol自己上ncbi搜~~望实验顺利~~
SDS-PAGE电泳的基本原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基硫酸钠),SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复希望你能满意。
最后说一下条带越跑越宽是必然的,条带最后终归会有部分弥散,就看你需要跑多少大小的蛋白,一般120V恒压65min10%或8%的胶30KDa以上都不会太弥散,如果你确实需要分离小蛋白,请使用glycine-SDS-PAGE,protocol自己上ncbi搜~~望实验顺利~~
那条白色的条带是你的目的条带吗?跑胶首先需要Marker,没有对照,无法判断蛋白条带大小。可以先加上marker重新跑一次,如果marker都没有跑开,说明电泳时间短了,或者胶的浓度不合适;如果marker正确,蛋白大小不对,说明实验结果应该是失败了。一般条带能够看见,就不应该是洗脱的问题。
3)非还原SDS处理:生理体液、血清、尿素等样品,一般只用1%SDS沸水中煮3min,未加还原剂,因而蛋白折叠未被破坏,不可作为测定分子量来使用。3. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用?聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关;..
SDS-PAGE蛋白质电泳问题 -
1,浓缩胶的要求就是将所有蛋白在浓缩胶和分离胶梯度的时候将所有蛋白压缩成一条线,保证他们在同一起跑线上。如果蛋白样品是不同时间的同一种,可能就是浓缩胶没摇匀。至于加样散,原因就可能是胶质不均了。对于结果应该影响不大。电泳时条带歪了,说明分离胶不匀,最前面的溴酚蓝如果不在一条线上好了吧!
SDS-PAGE电泳图帮帮忙分析20 marker没问题,胶用了两种方法配置,也是这样这是跑的正常的电泳图,提问的图不知道怎么回事跑成那样了。老师说是我的胶烧了,但是我用两种不同方法配置跑出来的都如提问的图。就是想后面会介绍。 marker没问题,胶用了两种方法配置,也是这样这是跑的正常的电泳图,提问的图不知道怎么回事跑后面会介绍。
sds-page电泳出现问题 -
电泳的那个问题是不是你点DNA液的时候没点好,要么就是通电的电压没调好脱色没完全退色是正常的,看的清楚就可以了……补充:那就有可能你的DNA没提的很纯,电泳分离不开来……再做遍吧,我跑过兔子跟河蚌的……应该是这个问题,
这样你就可以知道你的条带所代表的蛋白质的质量了.其次,你的电泳图最下面颜色很深的一大片是正常情况下不应该出现的.出现的原因可能是在提取蛋白的过程中出现的小分子量蛋白的杂质.胶跑的很直:)ps,最后不是溴酚蓝好了吧!这个是染考马斯蓝的结果吧?还有,不同的公司marker不同的,你要自己查好了吧!好了吧!
SDS-PAGE 蛋白电泳手册 -
深入了解蛋白世界,SDS-PAGE蛋白电泳如同精密的分子舞蹈指南。它巧妙地运用聚丙烯酰胺凝胶和电泳原理,将复杂蛋白分子按重量分门别类。在这个过程中,一系列关键元素协同作用,构筑起精确的分离舞台:基础配备: 电泳缓冲液,如甘氨酸、Tris和SDS,它们是舞蹈的指挥棒;考马斯亮蓝染色液和脱色液,犹如蛋白的等会说。
你好,SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严。我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可有帮助请点赞。