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MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项(

2024-07-16 02:56:54 来源:网络

MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项(

MTT比色法细胞活力检测实验中有哪些注意事项? -
博凌科为解答:(1)选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的内贴壁细胞长满时约有lo6个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT比色法细胞活力检测实验前,掌握每一种细胞的贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间,以后面会介绍。
MTT检测法主要用于评估细胞的相对数量和活力,而非绝对计数。在进行酶标仪检测时,为了确保实验结果的线性关系,建议MTT吸光度保持在0-0.7的范围内。MTT的使用应遵循新鲜制备原则,即现用现配,过滤后可在4℃避光条件下保存两周,或者配制成5mg/ml浓度于-20℃长期保存。为了避免反复冻融导致的分解,推到此结束了?。

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怎样降低MTT法实验过程中的各种影响因素 -
博凌科为解答:MTT比色法细胞活力检测中最重要的就是背景对照,就是不加细胞的对照。这包括两方面内容,一是指与实验孔相同,对照孔中也加入相同体积的培养基,各做3-4个复孔,取平均值,主要目的是为了减少培养基中含有的酚红对比色的影响;二是要在对照孔内加入与实验孔相同成分和浓度的药物(特希望你能满意。
MTT四唑蓝是一种能接受氢原子的黄色染料,可作用于活细胞线粒体的呼吸链,被活细胞的线粒体琥珀酸脱氢酶还原为水不溶性的深紫色结晶状产物formazan,MTT被活细胞吸收以及被还原为深紫色结晶物是需要一定时间的,所以要继续培养一段时间,待活细胞完全吸收MTT并充分反应后才能测定有帮助请点赞。
PC12细胞活力及凋亡检测方法(MTT、流式、细胞爬片HE、免疫组化protocol...
试剂与准备 首先,为实验提供基础,我们需要以下关键试剂:含血清培养基,为细胞生长提供营养 MTT溶液(50 mg PBS溶液避光保存),用于细胞活力检测 0.25%胰酶,用于细胞培养处理 PBS缓冲液,保证实验过程的pH稳定 4%多聚甲醛,用于细胞固定 重铬酸钾酸洗液,用于后续步骤的处理 PC希望你能满意。
需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。MTT一般最好现用现配,过滤后4ºC避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,..
MTT比色法测细胞活力的步骤 -
四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝操作步骤一、接种细胞1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞,计数。3、将细胞稀释至2.5×103-50×103 个/ml,每个微滴定板可容纳20ml细胞重悬液。4、用加样器在平底96孔板中间十列说完了。
博凌科为解答:不必洗,MTT与Fomazan的颜色不同,吸光谱也不同,实际上测的是OD570的吸收光,实际MTT的吸光度在此波长很小。Fomazan对细胞是有害的,部分细胞死掉后,Formazan结晶在其周围,如果清洗就丢失了。
MTT法细胞活力检测细胞活力时,如何确定加药物的时间? -
博凌科为解答:一般文献报道的方法,是贴壁细胞在细胞贴壁后加药物(一般为上板后24h),而悬浮细胞是上板同时加。但是,在操作中具体要根据实验本身要检测的指标来确定时间。如果是做有关细胞增殖的药物,加药的时机影响不大,主要是药物的作用时间起决定性因素;如果要检测的是其他一些指标(比如药物对希望你能满意。
这个不行的,细胞在经药物处理后,再加入MTT,就与细胞发生了反应,一般来说,加入MTT后,要在尽量短的时间内测定出结果才可以的,不然结果就不准确了,曾做过实验对比,放置几天后再测定光吸收值,与首次测定的光吸收值的数据相差很大,已不能准确反应实验情况,建议不要等七次处理完后一起测定好了吧!