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DNA的测定方法有哪些

2024-07-16 23:45:42 来源:网络

DNA的测定方法有哪些

实验室中常用的DNA分子量的测定方法有哪些 -
(2)荧光法,用PicoGreen荧光染料,测定DNA,RNA浓度比较灵敏,并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA,并且受其它杂质的影响不大,缺点要有专门的荧光检测仪器,试剂比较昂贵.纯化DNA可以买试剂盒,主要有膜吸附法,磁珠分离法,都很方便.RNA与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链,二是它的碱基组成与DNA的不同,RNA是什么。
测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光系说完了。

DNA的测定方法有哪些

dna一级结构的测定方法 -
一. DNA碱基顺序的测定(双脱氧末端终止法Sanger 1977)测定方法: 建立4套DNA合成体系,每套分别含有一种带同位素(32P 或35S)标记的dNTP 和一种ddNTP,如ddATP(或ddGTP , ddCTP , ddTTP )。由于ddNTP缺少3位羟基,所以,当其掺入DNA后,正在合成的DNA就会停止。这样就会合成长短不一并带有标记还有呢?
Giemsa染色法,TUNUL法,DNA电泳梯度法,流式细胞检测法。DNA损伤修复(repair of DNA damage)在多种酶的作用下,生物细胞内的DNA分子受到损伤以后恢复结构的现象。DNA损伤修复的研究有助于了解基因突变的机制,衰老和癌变的原因,还可应用于环境致癌因子的检测。
测定DNA含量用什么方法 -
测定DNA含量用分光光度计检测法。检测步骤如下:1、预热紫外分光光度计10-20分钟。2、取所需的比色杯,其中一只装入3毫升水溶液,作为空白液,用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。3、DNA含量的测定:取3微升的DNA样品加入比色杯,加蒸馏水至3000微升,混匀;将比色杯置入分光光度计中,调后面会介绍。
1.紫外分光光度计测2,荧光定量PCR测3,用试剂盒测(有那种特异结合DNA的染料的试剂盒)
测定DNA含量用什么方法? -
RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况,所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液等会说。
1.制备的DNA 在:(1)含有螯和剂如EDTA 中较稳定,因为EDTA 能螯和Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase;(2)在pH5~9 之间较稳定,否则过酸过碱会破坏DNA 的结构;(3)有一定离子强度(强度越高, DNA 越稳定)的溶液中较稳定。(TE 满足以上要求, 但如需对所得DNA 进行酶切, EDTA 浓度不可过高等我继续说。
DNA的一级结构也即碱基在核酸链上的排列顺序是如何测定的? -
DNA测序(DNA sequencing,或译DNA定序)是指分析特定DNA片段的碱基序列,也就是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)与鸟嘌呤(G)的排列方式。最常用方法是Sanger(桑格)双脱氧链终止法,是弗雷德里克·桑格(Frederick Sanger)于1975年发明的。测序过程需要先做一个聚合酶连锁反应(PCR)。PCR希望你能满意。
是OD260在0.1到1之间最好。OD260值为1时,双链DNA一般为50ng/ul.单链DNA一般为40ng/ul,需要具体测的话还是用荧光定量DNA检测试剂盒,用多功能酶标仪检测。还有一种就是跑电泳,根据已知浓度条带的亮度对比你提的DNA亮度,这个需要分析软件,肉眼是无法正确比较的。