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细菌转化过程需要

2024-07-19 03:20:44 来源:网络

细菌转化过程需要

细菌进行转化的必要条件??
转化🐆🐣_🦂🐫:受体菌直接吸收外源DNA片段🌺——|🐋,通过交换🐾__🐩🌑,并把它整合到自己基因组中⚾-🐏🌻,再经复制就使自已变成一个转化子🀄——|🤣。转化的必要条件🥀😨|-⚡️😺:外源DNA🦡|🪴:一般分子量为1106😿🎰|🌙🦠。呈质粒形式DNA转化率最高🌑🎳_-🤿。受体菌必须处于感受态🤣😁|🐃🐁,例如利用CaCl2处理E.coli🤭🦃————🌿,即可使其呈感受态🎮——|🐭。
加热灭活的S型细菌遗留下各个DNA片段🕊-_🍁,其中包括控制荚膜形成的基因🎽——-*🥅,这些片段从S细菌中释放出来🥀-_🎈,并且在后继的培养中被一些R型细菌所摄取🍁||🐌,进入R型细菌的细胞中🦇-|🎃,以同源重组的置换方式🪶-🦕🌓,整合进入R型细菌的基因组中🌵|🐸,使R型细菌转化成S型细菌🐥-🐱😪。可见😴-|🦡,转化后形成的S型细菌内含有两种DNA(R型和S型)🦊☘️|😾。而后面会介绍⛅️——_🎗⛈。

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细菌转化实验步骤??
细菌转化实验步骤如下🎱🎾——🐞😹:1🐺🌓_|🤧、事先将恒温水浴的温度调到42℃🤐——🏒*‍❄。2🐣|——🐁🦗、从-70℃超低温冰柜中取出一管100μL感受态菌🥍🐅|-🪰,立即用手指加温融化后插入冰上🌛👹_-🎋,冰浴5到10min🎲🦆|——🌳😀。3🌤-🐐😺、加入5μL连接好的质粒混合液DNA含量不超过100ng🐸🐲||🦥🐁,轻轻震荡后放置冰上20 min🏉-🕹😮。4☄️_——✨♣、轻轻摇匀后插入42℃水浴中1到2min进行热休克🦝🐞|-🕊🌲,然后迅速好了吧🌜_🧐🦛!
就是R型细菌的DNA细菌转化指某一受体细菌通过直接吸收来自另一供体细菌的含有特定基因的脱氧核糖核酸(DNA)片段🐘🦂-_🐆,从而获得了供体细菌的相应遗传性状😆|_🐚🤫,这种现象称为细菌转化🐗-——🪡。例如⚾🤡——😿,把肺炎双球菌RⅡ型无毒株和加热至60℃被杀死的SⅢ型有毒株🌷😵|🥋,混合注射至小鼠体内🐸-|🏵🌳,结果在小鼠体内出现了生活的SⅢ型有毒株🦠||🥈,..
感受态细菌转化时需要多大的质粒浓度???
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的🎋🐦||🌙,比如构建腺病毒载体时🐋🌱-🐊。但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞🐍🏏_😿🤩,转化效率非常低🦊☀️——🌦,一般需要电转或者其他的特殊处理🥌☺️——*🎗。增加收菌次数🌜_——🥀,相对提高了质粒的量🐓_|🌼🦡,这样的话裂解液的量可以适当增加🐙|——🐕;裂解要充分😅🐕——-🥉*,变性和复性按说明应该是不超过5分钟🌧🙉_|🤬🤧,合理控制时间😧_🎇🙀。
1♟☀️|——🥀、细菌菌株的选择🐍-|🌏🦁:不同的细菌菌株对转化的效率和成功率有差异🌵🕊-_🐫。某些菌株具有较高的转化效率🦃|🎽🐋,选择适合的菌株是成功转化的关键☘————🦂😚。2🌧_🏒🦘、DNA质量和纯度🦔🎿_🤩:外源DNA的质量和纯度对转化的成功与否至关重要🌱||🌦。高质量🎿-🐓、纯净的DNA样本可以提高转化的效率🐟🐪——🥏。3🌺🦒——-🌸*、DNA浓度🌨😹-——🐕‍🦺🐟:适当的DNA浓度可以提高转化的效率🍂|👽,过高或过低的好了吧🕸||🍀🎊!
温度对细菌转化过程的影响机制??
温度对细菌转化过程的影响机制如下🍀——|**:各种细菌都需在最适生长温度的范围内生长🤨-_🌲🛷。当外界温度明显高于最适生长温度🎋_🦮,细菌被杀死🌷🌹--🦡🌨;如果在低于细菌的最低生长温度时🐗😜__🐗🌿,细菌代谢活动受抑制🏵🦐-|😑🐕,则出现抑菌作用🎋🦎-|🐏🎾。高温😅🦦_🦍:细菌蛋白质🦅🦜——-🎯🌿、核酸🐹——🐿🐔、细胞壁和细胞膜及酶类因热力作用发生变性或凝固😮_🦦,活性消失🤪_|🦛😕,代谢发生障碍导致细菌后面会介绍🎀🌳_🐘🖼。
转化过程包括有转化能力的染色体DNA片段的吸附🪄😷——🐯、吸收和整合3个阶段🦝🪴|——🥏😲。外源DNA首先吸附在细菌细胞表面的一些接受位点上🐦——_🦔🪆。肺炎双球菌和枯草杆菌等细胞的接受位点没有专一性🐭——*,它们能吸附同种的DNA👽|——🐿,也能吸附大肠杆菌的DNA*😑_😌🕷。流感嗜血杆菌的接受位点则只能吸附近缘细菌的DNA😧🦙——*。DNA在和细菌刚接触时可以被洗去👺————🎐🌼,在稳定后面会介绍🏵😹-🐨🤮。
感受态细菌转化时需要多大的质粒浓度???
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DNA)片段🎑|🌿,从而获得了供体细菌的相应遗传性状🐃|🙁,这种现象称为细菌转化😒——|🦥。自然界的转化现象🐅🐉——_🤗🦜,一般发生在同一物种或近缘物种中🦒😁-|🦍😭。细菌转化方法已被引入其他生物😨_🕊,例如采用原生质体转化法🐡*|🐖🥌,可将外源DNA注入到不具摄取DNA能力的生物中🌍|——🎮,使其获得某些新的特性🐩——😂😮。