细胞试验的mtt数据应该怎么分析
怎么对药物与细胞作用实验中mtt结果进行统计学分析?？
但由于不同细胞贴壁后面积差异很大*🎳-——*，因此🐍——🍂，在进行MTT试验前🐇🦗-_⚾🪡，要进行预实验检测其贴壁率🐥-😬😖、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线🦗——😁，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间*🐄|🦉😔，以保证培养终止致细胞过满🙄🐀-🕹🐓。这样🌾|-🦆，才能保证MTT结晶形成数量与细胞数呈的线性关系🪀——🪄。否则细胞数太多敏感性降低🦈——🎐，太少观察不到差异🎉🦙-|🦜🦓。
做这种药物试验🐘|🎽🐹，一般都是要要做药物梯度实验的😜😎-🤮。如果要算抑制率👺🕹-🦩😲，得做空白对照组就是不加药物的细胞孔*——🌎。用此孔OD减去实验组OD在除以空白对照OD,为了试验的准确性🥏🎁|-♟，每组药物浓度都是要做3个以上的副孔🪁——-😙😮，算平均值🕸🌹||🌓。
但由于不同细胞贴壁后面积差异很大*🎳-——*，因此🐍——🍂，在进行MTT试验前🐇🦗-_⚾🪡，要进行预实验检测其贴壁率🐥-😬😖、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线🦗——😁，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间*🐄|🦉😔，以保证培养终止致细胞过满🙄🐀-🕹🐓。这样🌾|-🦆，才能保证MTT结晶形成数量与细胞数呈的线性关系🪀——🪄。否则细胞数太多敏感性降低🦈——🎐，太少观察不到差异🎉🦙-|🦜🦓。
做这种药物试验🐘|🎽🐹，一般都是要要做药物梯度实验的😜😎-🤮。如果要算抑制率👺🕹-🦩😲，得做空白对照组就是不加药物的细胞孔*——🌎。用此孔OD减去实验组OD在除以空白对照OD,为了试验的准确性🥏🎁|-♟，每组药物浓度都是要做3个以上的副孔🪁——-😙😮，算平均值🕸🌹||🌓。
1🐒🎖||🎰🌩：接种细胞🐡——-💥🧐：用含10％胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液😕__🐞，以每孔1000－10000个细胞接种到96孔板🧨——🥀，每孔体积200ul.2:培养细胞☘|_🦔：同一般培养条件🙈🐓——🐬，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）🦉-🐘🎭。3🦌*——🦆😜：呈色🦛——🦗：培养3－5天后🦟_⚡️🦟，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS <ph=7.4>配)20ul.继续孵育4小时😋_😍，终止好了吧🧵——🎾！
1．制备1 mL细胞悬液🪄😀_——🐜🦊。空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液🐂🐟_🐸。加入0．1 mL MTT于37℃孵育4 h🤫🐱——🎐。使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶🌷——|🎿🎀。2．加1 mL DTW脱色液🌱*|🦎🖼，37℃至少静置30 min(甚至过夜)*||🌍，使甲质颗粒充分溶解🥀🌻|🐸🙃。3．吸取200 μL该溶解液至96孔板孔中🐋-🦦，在酶标仪上读取OD值🦝|🌲，检测波长570 nm🦊🦙|-🐿🎨，参考波长630还有呢？
MTT比色法测细胞活力的步骤?？
3🏈-🧩🐪、弃去孔中的培养基和MTT😅🦊————🌸🦦，在第1-11列所有孔中各加入200μl DMSO🐞*_🦟，以溶解残留的MTT-甲臜结晶🦍--🍂🐱。4🐗-_🎎🦏、在含有DMSO的各孔中加入甘氨酸缓冲液（每孔25μl）😞😵——🤠🌥。5🎖-😖、立即在570nm处记录吸光值🎐————🐓。读板仪用第1 列中含培养基和MTT但不含细胞的各孔调零😩🦀-_😛。五🏉🐀——|✨🦮、分析以药物浓度为横坐标（X轴）🖼|⛈，吸光值为纵后面会介绍🦕🛷|_😀🐍。
博凌科为解答😁🐥--🐡：（1）OD值转换为细胞数似乎不太好操作⚡️_🦓😔，就像楼上战友说的那样🧸🤮——_🤖，影响因素比较多🌓🐇_|🦎🪴，单个细胞活性与MTT转化量是有关系的🐘🌘|🤐🦊，所以需要有一个标准细胞活性的参照才能计算细胞数🦢🧸-|🐋🐇。（2）OD应该在0.2~1之间线性度最好🙀🐬_🤡🖼，2-3就不太好了🐔————🪄🪶，有时候1.5也凑合了🦣🦔_|🌼。（3）标准的MTT🐍|🏆😧，DMSO溶的话🤬😟——-🌼🙊，吸到此结束了？🌍💮-*❄。
我要做MTT实验,用药物处理细胞后做MTT,看抑制情况,但是不知道怎么样确...
做MTT时😔-🎣，用96-well plates的话🐡⛅️-🏸🎐，一般每孔分5000个或10000个细胞🐋😒——🐟🐈⬛，加100ul培养基🦄🏵__🦝🌜，培养24h后🦦——🦈🎱，加入不同浓度的药物🏸-🌍，每个浓度的药物一般设3-6个平行样🐡🎈_——🙈😎。给药24或者72h后🌏🐍-😖♟，加入MTT🦂🎃-🦇🤕，使其终浓度为5%（比如5mg/ml的MTT加10ul）👺🦄——😏。再培养4h.然后吸出培养基🐃————🌙，每孔加DMSO 150ul🎴|_🦗🐏，用酶标仪测570nm的OD值说完了🍁_-🌈*。
病毒复制等抑制50%所需的浓度🏏🐬|_⛸🐓。在MTT法中🦏--🦉🧿，就是以对照组吸光度OD值减少一半所需的药物浓度为Ic50😰😳——🐔🥋，除此以外🎎🦚-|😝，半数抑制浓度的含义还相当于药物对培养细胞的最小致死剂量的平均值🧐🏅_——👿🐲，作为反映药效的定量指标🪅——🐂。将对照组细胞存活率看做100%🐲-_🦢🐵，药物各浓度组的细胞存活率与之比较🎁-🦢🤐，差别有显著性（P 等我继续说🐏-_🐪。
PC12细胞活力及凋亡检测方法(MTT、流式、细胞爬片HE、免疫组化protocol...
细胞活力与凋亡检测 MTT活力评估</: 100 μl细胞接种在96孔板中🐭|😋，待孵育后🐤|🎿，通过测量吸光值计算细胞存活率😌||**，揭示细胞活力🙈|🐗。 流式细胞仪凋亡分析</: 在6孔板中接种细胞😤😈|-🦏🦗，观察并区分活细胞🐔⚡️————🐑🦮、早期凋亡等不同阶段🏈💐——_🌺，揭示细胞生命周期的动态变化🦘🐃|😆。 细胞病理学与免疫组化 对于HE观察和Bcl-2免疫是什么🎰——🦟。
其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中🐄——_😧😙，而死细胞无此功能⭐️🦠--🐭。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒🌹_🐵，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值🐄💀_🦑🐯，可间接反映活细胞数量😴🍀——|🤒😼。在一定细胞数范围内🐩🎋-——🌴，MTT结晶形成的量与细胞数成还有呢？