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用MTT法作细胞的生长曲线的几个问题

2024-07-16 08:02:11 来源:网络

用MTT法作细胞的生长曲线的几个问题

用MTT法作细胞的生长曲线的几个问题??
博凌科为解答♟🐀__😚🐜:(1)OD值转换为细胞数似乎不太好操作🌻_😑,就像楼上战友说的那样🦙_🦀,影响因素比较多🪲🌷|🐖🀄,单个细胞活性与MTT转化量是有关系的🤮🎿——|🎰🦎,所以需要有一个标准细胞活性的参照才能计算细胞数🕷|😉。(2)OD应该在0.2~1之间线性度最好♥🌏-——🦌🔮,2-3就不太好了😾|🧶,有时候1.5也凑合了🎯|🐚😉。(3)标准的MTT🕷🎽——_👻🌵,DMSO溶的话🐙💫|_😹😱,吸好了吧🧵-——🏸!
博凌科为解答*😧__🪡🪡:(1)选择适当的细胞接种浓度🐊——|😆😀。一般情况下*🐏-——🏈🏵,96孔培养板的内贴壁细胞长满时约有lo6个细胞🎏————😈🧿。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大😖——🦍,因此🌵😼|☘😶,在进行MTT比色法细胞活力检测实验前😯🦨_——🦓🤫,掌握每一种细胞的贴壁率😂😿|-🌲、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线🤓_——🐈,确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间😨😓-🐭,以希望你能满意🌱|🦈。

用MTT法作细胞的生长曲线的几个问题

细胞PCR的相关问题。回答一个问题就给财富??
——可以🦘-|🦓。2.细胞或组织提取RNA时🦄🦡-_🎐😔,加入Trizol 后是否可以放入-80度冰箱保存🌱__🐣🦂。——可以🏆🤨——🐃😰。3.多种肿瘤细胞做定量PCR测某个基因的表达的对比时*🪅_🐇👽,要不要再做琼脂糖凝胶电泳了?——不用🍃☹️-🐃🦮。4.细胞生长曲线测定(测8天)🌳-😴,使用MTT法😰|🦔,接种在8块96孔板上的细胞🦡🤤_🦛,隔几天要不要换液?培养液用无血清的还是说完了💀⛅️——_🐔。
1.制备1 mL细胞悬液🐀_🐖🐫。空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液🕸🐝——-🧵。加入0.1 mL MTT于37℃孵育4 h*‍❄🦩——_🦠。使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶🦀_——🐨。2.加1 mL DTW脱色液🐏——🐭,37℃至少静置30 min(甚至过夜)🐷_——🦗,使甲质颗粒充分溶解🐊——😖。3.吸取200 μL该溶解液至96孔板孔中🎾🦌-|🌦🌹,在酶标仪上读取OD值😗🐚——|🀄,检测波长570 nm😩——_🕹🦛,参考波长630希望你能满意🌞--🦜。
细胞生长曲线方法??
细胞生长曲线的测量方法主要包括两种🐇🦨_⛈🦋,计数法和MTT法♠-——🦚🙉。首先🤓——🦚,采用计数法进行步骤如下🐈——🧶:1. 从生长良好的接近汇合的细胞中*😫-🦅😔,使用胰酶进行消化🐤_🐅,然后将细胞制成悬液并进行计数🎾--😘。对于非粘壁细胞🦁🦎||🦇,需要先离心去除旧培养基😯🍄|-🦡,再加入新鲜培养基以制备悬液🐖-——🐬😏。2. 根据细胞计数结果🐩|🐓🦃,设定每个小方瓶的细胞密度为5×104是什么🧩——🦒。
MTT比色法😄🌤——*🎊,是一种检测细胞存活和生长的方法🤣🤪——|😛。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中🦐|🏑,而死细胞无此功能😮-🎿🐨。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒🦭*_🐕‍🦺,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值😡-🦡,可间接反映活细胞数量🐑__🕷。在还有呢?
设计一个实验检测某种药物对肿瘤细胞的生长具有抑制作用,说明实验原理...
MTT法吧🍃_😓😪,最简单最传统🙊🎄-🐬🤠。MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide🦝😭_🦡,是一种黄颜色的染料⛈-——🌚。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT🐔|🐰,同时在细胞色素C的作用下🦦🎱-😪,生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazan)🎋-|😓🐗,甲臜的多少可以用酶标仪在570nm 处进行测定有帮助请点赞🙀|🌷。
置摇床上低速振荡10min😊🦋_🐺🐉,使结晶物充分溶解😆-——🐡。镜下观察蓝紫色结晶已溶解就可以测了🐹-——🐫🐞。不能太晚测😭🐃-——🪆😝,MTT会变质🌾_🦙。
贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,,??
MTT粉末和溶液保存时都需要避光🌥🪅|🦢😹,用铝箔纸包好就可以🍄-🐊⚡️。实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光🏆|——🛷,觉得这样比较好🐡🦇-🦝🌚。MTT 步骤如下🦩_|🦎:1🌾——♥🪀:接种细胞🦗-🐂:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液🌵_|🐩😵,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板🥀🌦————🐬,每孔体积200ul.2:培养细胞🦊*-🦥🏓:同一般培养条件🥊__🍂,培养3-5天(可还有呢?
CCK8数据主要是统计OD450的吸收值🦔🎽——-🐩🎍,一般的数据形式如下🧿🌻|-🦡🐾,保存为csv 格式结果还不错😮🙂|_😡🤓,添加显著标志细节地方AI处理一下😥——|🐉🦚,当然如果你安装了esquisse 🙄🥎_😨,你也可以直接导出成PPT