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检测PCR条带亮度的软件

2024-07-16 07:43:33 来源:网络

检测PCR条带亮度的软件

求助 谁会用软件分析PCR电泳条带的 我想定量分析一下??
这个有个很好用的免费软件Image J🏆——🪁,是NIH编的🐣🐝|-🤢,做这个分析最好了可以到这里下载
可以照胶的时候去调节亮度🛷🤭——-😟🌴,对比和γ射线🕊_——🐑🐩,然后会清楚一些🌴🌼__👹。同时🙊🦟——🐏🎇,你优化下PCR扩增条件之类的🐤-☹️,提高扩增效率🐗——_🐡。希望对你有帮助🪱-💮🌚。望采纳🙃-🐷🌔。

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pcr条带模糊。这是神马情况???
2. 优化PCR🤨||*‍❄🌲:模板浓度⛈__🌷、Mg2+浓度*|😳🐀,酶的用量🦓__🍀*,退火温度增高等🌩🌪——🐭😳;3. 重新设计引物🐁|🦖😟,提高引物特异性🦏|👿🎳。可先在NCBI网站Blast看看引物是不是特异性很强*‍❄——😜;希望有帮助🦘🌓|🦀🐖。祝好运🐿💀-🐟!
给图看看✨_🐌🐂,MARKER清晰吗如果都不清晰的话🐊😼-|☁️🦡,那就是电泳系统找找原因如果就是条带不清楚的话🌹😍__🦄,那可能是扩增效率不高😋🐌_🤠,
PCR电泳时maker条带很暗的原因???
原因可能是缓冲液的问题🧸🍂-——⚡️,也可能是你点样水平太搓了🔮🐔——🌱🎐,
一般来说marker是不会有问题的⛸🪄——|🤒,可能是胶或电泳液的问题🌵——😴,胶没煮好💫-🧐、做的不均匀🌲😌——🎰🐟、电泳液用的时间太长😆🦌|*、做胶的电泳液浓度不对都会有影响😤|🌾🤒,
跑PCR后,琼脂糖电泳后显现不出来条带,阳性对照也没有条带,只有maker,跪...
MgSO4和KOD-plus呢?我们这边的体系是33.5ul水🐑||🐺,5ul10xKOD-plus Buffer🐁🐯_-🐔,5ul dNTP😣🌲__🌑,2ulMgSO4🙁🎽|🕷😏,2ul模版🐅——*🥅,1.5ul引物😪😢-🐁🧨,1ulKOD-plus
看溴酚蓝的位置在很上面*🌹|_🌼😝,说明条带分子量很小🪲|——🐋,电泳电压低🥊💀|🤤,导致样品弥散😮🍁|-🤬🥍,条带我怀疑是引物二聚体🦑♟-*,而非目的条带🐘-🦠。建议先跑touchdown🤩-|😣,确定引物能够跑出来😢😎-😆😰,再慢慢摸索具体的温度😕-🦕🌱。
PCR扩出来的条带亮度很弱是什么原因??
2.首先考虑扩增效率问题🐇🐲——🥍,可用touch down PCR🐜——🤧🤩,除开头几个循环外⛳-🏐,后面的退火温度降低一些🦆|🤬,可提高扩增效率🥍__🌚😹;3.如果无效🦆🤨||🎄,建议使用两步法🏏🥈-*,95度1min😻-🐌🌩,(60-65)度3min🐟-——🥏🏵,可加入touch down 步骤🎍_|🪰;4.不知道反应体系如何配置😍-——🐝🎟,应该是使用了GCbuffer吧?TaKaRa的GCbuffer(尤其是II)的确会降低一些扩增效率到此结束了?🦡——_🐲🎭。
可能是二聚体吧🦉😿——😶,你可以在电泳旁边加一个MARKER🥏🏑_🐫🎉,这样就可以选出目的条带了吧🌦🎁——🐈。我PCR扩增的产物也有二聚体产生🤗-——🐍,比较短的链🐚🌾|🐔,一般会在目的条带的前端😀😽——🕸🐅,很容易看出来的🔮😆_⛸🕊。