怎样OD600测菌体生长曲线(
细菌的生长曲线如何确定,有何意义??
细菌的生长曲线有4个时期🎽——🐿🌲:调整期⚾-🤡🦙,对数期🤯——💀😵,稳定期🥎|🐔,衰亡期.它表示了细菌生长过程中各个过程的情况😧-——🌳🏉,每个时期都有自己特定的优势微生物.你可以参照生长曲线🦙🙊|🐖,根据你的需要控制微生物的生长*🧵_🎑,来达到你需要的效果.
通过紫外分光光度计监测培养物混浊度🤤-_🐯🏸,如UNICO公司600nm处测定OD600监控E.Coli生长🎮——🐡。菌丝长度测量针对丝状真菌🦜🐬-_🥏🦡,测量菌丝生长长度⛈_😛🎖,如玻璃管接种法☀️——🐽。微生物计数法血球计数板法🐀_🎳🐸:通过油镜统计微生物数量🥎_*,适用于单细胞和孢子计数🐇🏒_🌜🦅。 染色计数法🐽🐩|👹:染色后显微镜观察活菌🪄🐫|🪡🤪,如酵母活细胞计数😐🐘-😠。 比例计数法🦄_🐊:..
细菌的生长曲线有4个时期🎽——🐿🌲:调整期⚾-🤡🦙,对数期🤯——💀😵,稳定期🥎|🐔,衰亡期.它表示了细菌生长过程中各个过程的情况😧-——🌳🏉,每个时期都有自己特定的优势微生物.你可以参照生长曲线🦙🙊|🐖,根据你的需要控制微生物的生长*🧵_🎑,来达到你需要的效果.
通过紫外分光光度计监测培养物混浊度🤤-_🐯🏸,如UNICO公司600nm处测定OD600监控E.Coli生长🎮——🐡。菌丝长度测量针对丝状真菌🦜🐬-_🥏🦡,测量菌丝生长长度⛈_😛🎖,如玻璃管接种法☀️——🐽。微生物计数法血球计数板法🐀_🎳🐸:通过油镜统计微生物数量🥎_*,适用于单细胞和孢子计数🐇🏒_🌜🦅。 染色计数法🐽🐩|👹:染色后显微镜观察活菌🪄🐫|🪡🤪,如酵母活细胞计数😐🐘-😠。 比例计数法🦄_🐊:..
将所测得的光密度值(OD600)与对应的培养时间做图🐕😤|——💐,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线🎃-_♥。注意🐾😦-|😟🎀,由于光密度表示的是培养液中的总菌数🐉🐀_😷,包括活菌和死菌🎎__😭,因此所测生长曲线的衰亡期不明显*🙉|-🎁🌏。从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间🐏🐟_🐔,即代时🐪🦐_🧨🦫,以G表示🐰🦊-——🦌🌻,其计算公式为🌵🏸_🐭🦎:G=(t2-t1)[好了吧🎈😋__🌞!
5.4生长量测定将未接种的肉膏蛋白胨培养基倾倒入比色杯中🌎🙄——🎃,选用600nm波长分光光度计上调节零点🦋——🐤,作为空白对照🪡_🌪🤐,并对不同时间培养液从0h起依次进行测定🦕🤣——🐦♣,对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定🌲——🌑,使其OD值在0.10.~0.65以内♠⛳——_🙊,经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数🦕|-☘,才是有帮助请点赞🐜🪀-——🧧🦂。
微生物生长曲线的检测方法??
将侧臂插入光电比色计的比色座孔中🐼-🧿,即可随时测定其生长情况😧🐽_🦡🌚,而不必取菌液🌵_🦐。该法主要用于发酵工业菌体生长监测🧿🎳————*。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计🐥_|🐤,在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600,以此监控E.Coli的生长及诱导时间😈-——🎟🐾。菌丝长度测量法🦅——-🐰:对于丝状真菌和一些放线菌🐫😶|🐓🐞,可以在培养基上等我继续说🌕-|🎱🦎。
因为在600nm下*|🐕🦺,菌液中菌体密度与该波长下的吸光度值(OD)在一定的范围内存在线性关系 因此可以用来定量 其实有时候也不一定是600nm😰🦟_🌿,也有可能是该波长附近的某一个值 可以通过全波长扫描找到附近具有最大吸光值的波长作为测定用波长波长选定后跟培养基没什么关系 但是培养基的组成可能会影响等会说🍂_——😭。
微生物的生长曲线??
第一阶段是适应期🏵-_😿🐫,在这一阶段🌙😊||🤭,微生物刚刚被放进一个新的环境里🐡_|♠,需要适应并且为以后的生长做准备工作🐰🀄——🐗,例如合成有机物🐭🕸——🎏🐐,蛋白质等等🐗_🦖🛷。第二阶段是对数期🦍💥||🎆,在这一阶段🤢_-🌱,微生物生长速率达到最大🐑_|🐨,新陈代谢活动增多🦕🦕——🌸🦛。第三阶段是稳定期🕷♦|_😊👹,在这一阶段🎍——🎉🏵,微生物的数量保持在最多的状态🧶😠-_🌴,但是停止增长👻🐡_|🌸🎍,因为培养有帮助请点赞🦩🀄|🦓。
1. OD600值(光密度或吸光度)🤗——-🙀🦀:光通过酵母细胞悬浮液时🍂🧿——-🎮,前后强度比值的对数值(使用分光光度计可以测定特定波长下的光密度)🐓🌈-🦂。2. 酵母生长曲线绘制🦊🐟--🦍:将蛋白胨和酵母提取物搭配好之后(如果制作固体培养基需要加入琼脂)🍁|-🌼,使用高压灭菌锅进行灭菌🌿--🏸。固体培养基可以用来划线酵母🦈——_🌲,获得单克隆🐲|-⭐️🤭。3. 平板划线后好了吧🐰🌳|🪶!
为什么我在测细菌的OD值时,没有最大吸收峰出现呢?我想做一个全扫描...
做了多年微生物酶听说过离心稀释测生长曲线的🦖🌾————🐡。🧶|🐟。⭐️_|👹。最好是一次性做20支试管的液体培养基同时开始培养🏅🐀——🌹🤤,每2小时取出一管测定OD600🤭_-🎱,这样不影响其他试管继续培养🌷|🐕🦺,0~12小时之间可以每4小时测定一次(这段时间是快速生长期测太频繁没什么意义)🪡🐜|——🐵,12~26最好每2小时测定一次(一般快速生长转入稳定期就在这个好了吧🦧☹️————♠🦨!
建议你将OD值转为菌体干重🐣——🎲,这样就更加准确了🐂🐲_——🎨,转为菌体干重的过程🦖--🦙👹,只需要在做微生物生长曲线的过程中🌲🎰||🌙,不仅仅要测定OD值🪱🐬_——🦛,还要将菌悬液进行离心⚾🐈——-*,用生理盐水进行洗涤🎰——🌴,再离心等步骤😲——😋,然后将菌体干燥🧧😁————🤤,测定菌体干重🙃🌻——🪶💐,这样就可以得到OD值与菌体干重的对应关系🌳🌳_——🤪。