关于SDSPAGE电泳

关于SDSPAGE电泳

什么是sds-page凝胶电泳??？
sds-page凝胶电泳原理是根据检体中蛋白质分子量大小的不同🌚🌨-——🐥，使其在电泳胶中分离🐙——🤿。SDS是阴离子去污剂🕷|🌒😿，作为变性剂和助溶试剂🦖👿-🦃🤧，它能断裂分子内和分子间的氢键🤪——-😄🌵，使分子去折叠😆🥈_😋🐀，破坏蛋白分子的二🙉🐼|🌙、三级结构🐏🦫|——🌔🐀。而强还原剂如巯基乙醇🎆-*☘，二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂🤫🏅-_🎯。在样品和凝胶中加入还原剂和后面会介绍💐-🐵。
主要用于分离蛋白质或者核酸🦥🦂--🌺，不同浓度的分辨率不一样🪄|🤤，比如一定高浓度的胶可以分离质量分数为1000和1100的🌖🦠_——🎰*，而浓度降低后就难以实现1000与1100的分离🌹🏉||🌼🐣。化学聚合以过硫酸铵（APS）为催化剂🐷-🦑，以四甲基乙二胺（TEMED）为加速剂🐡|——*🦖。在聚合过程中🏈🏵——♦，TEMED催化过硫酸铵产生自由基😁🤬|——🌑，后者引发丙烯酰胺单体聚合🏉🍄|_🐒，同时甲说完了🌾*_🌟🍃。
sds- page是什么??？
SDS-PAGE又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳⛈——|🔮，其作用具体如下🦜🎄|——☀️：由于SDS PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度*🐭-🎴🦖，因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度🤩🐕‍🦺——-🐸🐍。SDS应用于提纯过程中纯度的检测🎑-🌷，纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带🪡🐅||🐘😘，但如果蛋白质是由不同的亚基组成的🐑🙂_-🦅🐙，它在等会说😭🐞——🌲*。
形成带负电荷的蛋白质复合物🙃🌪——|🦄。相关介绍😞——_🦏：电泳所产生的复合物由于结合大量的SDS🌾*_😨🥎，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为🤩|🌩，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异🐾🐌——🦖，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的🔮🎋——😎，因此在进行电泳时🐈🤓|-🐀🎟，蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小🦃🦨-_🦌😵。
sds在电泳实验中的作用?？
3👹☀️_——🐃、SDS还可以用于测定蛋白质的分子量*|_🦃。在SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）实验中🕷🐑|🤮，我们可以通过比较不同样品中SDS-蛋白质复合物的迁移距离来确定它们的分子量🌥_🎴🐳。这是因为SDS-蛋白质复合物的迁移速度与其分子量成正比关系🐝*_🥊。关于SDS的相关知识1🐺🌹————🦋、SDS*_🌜，全称为十二烷基硫酸钠（Sodium Dodecyl 希望你能满意🐂☘️__🦕。
聚合时丙烯酰胺分子通过加成反应形成长链🐨__🐨，双体的作用是在长链之间形成交联🦘——🕹😖，成为具有三维网状结构的凝胶*🤕-🐇。所以在凝胶电泳中除了具有电泳的分离外还具有分子筛作用🦖🦎-🐪🐝，从而增高了它的分辨能力🐆_😔。聚合时🐅🦏——🦚💮，根据分离的需要🌚|😮，可以用改变单体溶液浓度或增减双体比例的办法制成孔度大小不同的凝胶🎊-|🙈🐘。在分离血清蛋白时🎄_🐩😭，我们有帮助请点赞🦝——_🐇🐖。
做蛋白质的sdspage电泳为什么脱完色没有条带?？
染色后🪢😄——🐙，还需要脱色液（有乙醇🦩🌱——😐😳、醋酸）脱色🐒|🐉，不脱色的话全是蓝色🪴🌾-🕊，不能区分条带😅😔|🐄。脱色后🪀-_🌼，条带才能显示出来🌚——🎫。在跑SDS-PAGE时🐩🐦--✨🐩，需要点Marker😩💐——|🦭🍀，正常情况在染色🐷——🧨🌒、脱色后能至少看到Marker的条带🏒😱-🦕。如果Marker都没有🥍——-🪅，那就是电泳问题了😖-😍🦒。蛋白浓度不够🦉⛸_☘️、跑胶的时间过长或过短🌥-🌼🦙、仪器问题🤤|-🪶、正负极不要插反🪲||🪆。
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N🎭*————🦁🌕，N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP)🌖__🐼🦂，N🌱_——🦡🙀，N🐞🧶_😂🌷，N’🐥🦇-🐨🕸，N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下💐🐀|🦕🦁，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶🌼😝——_🪱😄，并以此为支持物进行电泳🀄🦜——🐀。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及好了吧🎮_*！

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