什么原因造成GC含量高
什么原因造成GC含量高?？
GC含量高😠_-🐍🏈，一般见于高等动物（包括人）基因的调控区🐌|_👿。CpG是DNA甲基化的位点🐸——🎖😕。甲基化后🥎😯-_🦋🪱，DNA转录降低🤯|-🎲。是一种调控手段🤔🕷-😺🎆。在进化过程中🐽😨|🐱🧿，基因调控区的变异要大于编码区🍀💐————😐🦎。因为编码区突变有可能造成致死性功能改变🌿|-🌟。而调控区的突变则有可能引入更多的GC🎖🐿-😙。
【答案】🦫--😬🎇：GC含量为70%的Tm值高🖼🐄_——🤣。因为G-C对之间有3个氢键😱——🤑，而A-T对之间只有2个氢键🐆-🦙🧧。考点]影响DNA的Tm值因素🐣🖼_🏆。DNA的Tm与下列因素有关🐩——|🐜🌍：1)DNA的均一性✨-🏅🏐：均质DNA的熔解过程发生在一个较小的温度范围内🥍-🎄⭐️，异质DNA熔解过程发生在一个较宽的温度范围内🤗🙄_🎳⛸；2)GC含量🐖————*：在pH 7.0🌒|🐰，0.165 mol/L的说完了🐏🦑——🪶。
GC含量高😠_-🐍🏈，一般见于高等动物（包括人）基因的调控区🐌|_👿。CpG是DNA甲基化的位点🐸——🎖😕。甲基化后🥎😯-_🦋🪱，DNA转录降低🤯|-🎲。是一种调控手段🤔🕷-😺🎆。在进化过程中🐽😨|🐱🧿，基因调控区的变异要大于编码区🍀💐————😐🦎。因为编码区突变有可能造成致死性功能改变🌿|-🌟。而调控区的突变则有可能引入更多的GC🎖🐿-😙。
【答案】🦫--😬🎇：GC含量为70%的Tm值高🖼🐄_——🤣。因为G-C对之间有3个氢键😱——🤑，而A-T对之间只有2个氢键🐆-🦙🧧。考点]影响DNA的Tm值因素🐣🖼_🏆。DNA的Tm与下列因素有关🐩——|🐜🌍：1)DNA的均一性✨-🏅🏐：均质DNA的熔解过程发生在一个较小的温度范围内🥍-🎄⭐️，异质DNA熔解过程发生在一个较宽的温度范围内🤗🙄_🎳⛸；2)GC含量🐖————*：在pH 7.0🌒|🐰，0.165 mol/L的说完了🐏🦑——🪶。
GC含量高😑-🐱🥉，说明解链温度高目的条带在较高温度才会解链🐚|🎍，而在未达到解链温度时🏒🌾_-🌍🌷，引物会以未完全解链的DNA为模板😌——🕊，进行PCR非特异性扩增🏑*——*，所以易出现非特异性条带🐑|-🐫。降低退火温度🐀🐚_🐓，DNA复性减缓🌚_😫，增加非特异性互补机会🦗-|🌻😦，使非特异性条带增多🎍🐪|🐀🐅。
55摄氏度🌵——🐏🦩。gc是PCR技术中的一项元素🦅🐗——🦄*，在该技术中🌴🌍|-🌪😧，GC含量高🦋🙂|——👹🥇，说明解链温度高🦊——🦊😨，GC含量最高为0.8时🌱*——😾🦛，其退火温度就等于55摄氏度🌴🌱——🐼，退火温度可提高反应的特异性🐑——🎎🎽。
为何gc含量高不利于退火呢?？
解链温度高*__🧶。在化学结构中GC之间有三个氢键🦟😤|🎲，条带在较高温度才会解链🐾🐚————🐳🎎，而在未达到解链温度时🐄🐿||*，引物会以未完全解链的DNA为模板🌘😀——🤥☀️，由于解链温度高🦈🎰-|💫，gc含量高不利于退火🐈🍂__🐏。GC含量是在DNA4种碱基中🌟🌖_-*💐，鸟嘌呤和胞嘧啶所占的比率称为GC含量🏉-|🌳🍃。
楼上的回答不错🐷🎟-|🎭🏉，GC之间有三个氢键🦈-🐒，稳定性较高🌧-🏒，相对于AT之间的两条氢键而言🐫⛸_*🪁，GC之间难以断裂😌🎰————😓😡，而AT之间的氢键断裂程度比GC高🌥🌵——🦨😞，所以在DNA扩增后🍄_🏸，AT复制的比较多🌦|-🦛🍁，所以含量高🦆-|🧩🦀。
为什么gc含量高不好进行pcr?？
gc之间3个氢键🐬🐉|_🐔🌵，打开时需要的能量更多🦏-🏈🎏，被扩增的机会相对少🐲🍂-🌷😰，导致最终pcr结果中低gc含量的片段扩增的比高gc含量的片段多🕷🦖|_🌑🦕，
早S期早复制的是GC含量高的DNA序列🧨——😥🎽，而晚复制的DNA序列AT含量高在真核生物的染色体中🧿-🐱🦊，一般着丝粒区富含AT碱基对🦓🤠-🕹，属于异染色质区🐈-——🦊🦠，该区域是延迟复制的区域🐉————🐰，甚至会延迟到M期开始才开始复制*_🐋🐽。
克隆全长的时候反向引物GC含量太高怎么办?？
方法如下😈🤑_🦡🎀：1）一般的公司有提供专门扩增高GC序列的酶和buffer提供😹_|🏈🏅，可以考虑😅————🐈🪳，我们用宝生物的LA酶和GCbuffer🎄🍂_🦗。2）可以将序列扩增长一些🦅-|🐯，避免引物GC含量过高的区域🐓——_🧵，2步克隆😔🎄——😼。3）反应中加入DMSO等改进方法也是可行的🎀*_🦍🌩，但对GC>75%的可能没有效果的🐣🌼|🐉🐊。4）序列不长的话*——🌾🦜，可以考虑人工合成🤗|-♠🦢。
TakaRA有一种酶叫做TakaRa LA Taq酶是专门对高GC含量的🦅_😛🦌，当扩增具有复杂的二级结构(GC rich等) 的模板或具有重复序列的模板时🐄🦆|🍂*，使用GC Buffer进行PCR扩增将非常有效.里面有两种GC buffer,如以人基因组DNA为模板🥌|——😪，