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mtt的细胞的杀伤效果是怎么算出来的

2024-07-16 09:29:27 来源:网络

mtt的细胞的杀伤效果是怎么算出来的

贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,,??
一般每孔4000个细胞为宜🧐——🦖🤥,既细胞浓度在20000个/ml🐗__🤬🌑,MTT加20ul😚——|😍😙,作用四小时后洗掉上清液🦆💀||😣,注意不要将甲瓉洗掉🥊|🕸,然后每孔加150ul DMSO🦬♟————🪢🦂,在脱色摇床上振荡10分钟🤗🌵|*🦭,然后测吸光值😋——🏒。一般要低于IC50🦘😐-|*‍❄,避免非调亡性杀伤的细胞太多🦒🐀-🐚🎯,造成流式细胞仪检测碎片太多🐃——-💐🐷。我一般用1/2-1/3的IC50🌍|-*,作用时间为36h🐙🤓--🌤🎄。一有帮助请点赞🐗🧐-🕸。
⒋培养时间🦏🐾_🧨。200ul的培养液对于10的4~5次方的增殖期细胞来说😣|🐣⛅️,很难维持68h😫🐓_💫,如果营养不够的话🐭🌷--🙀,细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止🎁--🌱*,影响结果🦌|🎍,我们是在48h换液的🐲|🦡。⒌MTT法只能测定细胞相对数和相对活力🐹——🌾,不能测定细胞绝对数😐——_😢🥊。做MTT时🎾_🦠,尽量无菌操作🌧——_🎑,因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高😘🐁-🎋🏓。⒍理论好了吧🎍😛|-🐿!

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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒有哪些注意事项???
1.收集对数期细胞🤤🦒——🦄,调整细胞悬浮液浓度😱🌈————🦑,分于96孔构👿🤩-😦🐦,每孔180u1🤪🌹-😱,3000一10000细胞/孔🐍-——😢🌺。2.置 37'C😮🐺-——🥌、 5%C O2 温箱培养使细胞贴壁🐄|🌜🏉,培养 6-24 小时🎋|🌷🪲。3.加入适当浓度的受试化合物💫_😖,继续培养适当时间😙——-🍁。4.小心吸去上清*🦛|-🌕,加入90u1 新鲜培养液🦎🌝-_⭐️🦚,再加入 10u1 M T T溶液🕹🦖_🎭🤣,继续培到此结束了?😗_——🃏🥀。
在MTT法中🦚🐹——🌹😔,就是以对照组吸光度OD值减少一半所需的药物浓度为Ic50🕸——⛈🐩,除此以外🏉|_🦓*,半数抑制浓度的含义还相当于药物对培养细胞的最小致死剂量的平均值🐑🌸——|🌎😿,作为反映药效的定量指标😚-——🐍。将对照组细胞存活率看做100%🐈‍⬛🌼-🌿🌸,药物各浓度组的细胞存活率与之比较😪🌿——🎊,差别有显著性(P 等会说🌩😔__🐡。
贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤是什么?详细点,,,??
MTT比色法🐿🐩——😷💐,是一种检测细胞存活和生长的方法🛷😐|🐚。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中🥅🦊_-*🌒,而死细胞无此功能😛|🎎。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒😀☀️-🦒😓,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值🦉😂_🏸🌺,可间接反映活细胞数量🐱——|🎖*。在说完了🍁🐑|🌱。
可以提高药物起始浓度🛷🐨_-🌑。做这种药物试验♦——_🙈,一般都是要要做药物梯度实验的🥅🦩--🎽😆。如果要算抑制率🐪🦢-🐖🕊,得做空白对照组就是不加药物的细胞孔🐖🎨-😲🐪。用此孔OD减去实验组OD在除以空白对照OD,为了试验的准确性🕸🐤-_🏆😂,每组药物浓度都是要做3个以上的副孔🌿😰|-🎿🎆,算平均值*😇-🦀🐼。
mtt检测hele细胞活力越小结果越好吗??
mtt检测hele细胞活力越小结果越好MTT主要有两个用途🤫|🌕🧿:1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定🐰_🎇😭;2.细胞增殖及细胞活性测定🐗🐅——🦙。MTT原理🐘🌖-🐰:检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢(Zā)(Formazan)并沉积在细胞中🦈⛈_|👺🍁,而死细胞无还有呢?
MTT比色法🤔|🐤,是一种检测细胞存活和生长的方法😎🧶|_⚡️⚾。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中🎴__🐃🤬,而死细胞无此功能🦁——-🐕。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒🎲|🦓😖,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值🌧🐄__🤨,可间接反映活细胞数量♣-🍂。在还有呢?
PC12细胞活力及凋亡检测方法(MTT、流式、细胞爬片HE、免疫组化protocol...
细胞活力与凋亡检测 MTT活力评估</: 100 μl细胞接种在96孔板中🍂🦈|😍,待孵育后🐌——🦀🦜,通过测量吸光值计算细胞存活率*|😆,揭示细胞活力🐡🏵_🪶。 流式细胞仪凋亡分析</: 在6孔板中接种细胞😹——-😋,观察并区分活细胞🌤|——🦈🦁、早期凋亡等不同阶段🍁|🦗🦛,揭示细胞生命周期的动态变化💮————🐔🦔。 细胞病理学与免疫组化 对于HE观察和Bcl-2免疫等我继续说🐺——🌴🐷。
要看你流式用的是哪种方法了🦏🕷||🦆。如果单用PI染色🤫🐕|——💀🦙,阳性的就是死细胞*-🦙。细胞膜受损😐_🎨🦕。如果用Invitrogen的Live/Dead方法🤢——_🐱🦜,死细胞和活细胞都能分别染色🪱🐫——🎄🐍。活细胞内ATP充分🦊|🎄🐉。酶还有活性😎|😯。可以产生荧光物质🕊🐁————🎣🧵。死细胞的细胞膜损坏😓_🐡🎖,导致DNA被染色😏*-_*。理论上比例应该接近🐽|_😮,但是原理不是完全相同🌱——🌷。所以结果会有一些差别😙🕸_♠🐍。