elisa中冻干标准品用什么冻干液
酶联免疫吸附测定实验(ELISA)的操作流程,谢谢大家?？
2．空白孔加标准品和标本稀释液😈*--🖼🐝，其余相应孔中加标本或不同浓度标准品(100ul/孔)👹--🐒🪳，用封板胶纸封住反应孔🦘——🎯，36℃孵箱孵育90分钟🎿|🎋。3．提前20分钟准备生物素化抗体工作液✨__🐙。4．洗板5次😚🐥|——🐨。5．空白孔加生物素化抗体稀释液🙊🎮——|🙈，其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)😔——🐱。用新封板胶纸封住反应孔🦚🍄-🐬🐳，36℃孵箱孵到此结束了？🎋🐬__🦘*。
标准品一般为含有被测物的基质血清*🎍|🌧🪡，理论是来说是可以的养细胞🐐|🤮，但是现在有很多都是用一些缓冲液代替🐒--🐖🐤，用时需谨慎♦-🐫，
2．空白孔加标准品和标本稀释液😈*--🖼🐝，其余相应孔中加标本或不同浓度标准品(100ul/孔)👹--🐒🪳，用封板胶纸封住反应孔🦘——🎯，36℃孵箱孵育90分钟🎿|🎋。3．提前20分钟准备生物素化抗体工作液✨__🐙。4．洗板5次😚🐥|——🐨。5．空白孔加生物素化抗体稀释液🙊🎮——|🙈，其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)😔——🐱。用新封板胶纸封住反应孔🦚🍄-🐬🐳，36℃孵箱孵到此结束了？🎋🐬__🦘*。
标准品一般为含有被测物的基质血清*🎍|🌧🪡，理论是来说是可以的养细胞🐐|🤮，但是现在有很多都是用一些缓冲液代替🐒--🐖🐤，用时需谨慎♦-🐫，
标准对照稀释液是已知浓度的😿🦜-_🪰🐙，稀释标准品是用来做标准曲线的🐄-_🐗🐆。样品稀释液是未知浓度的👻——-🦃🐄，稀释样品是为了将测量数值落在标准曲线范围之内🌲*❄-😇。这样根据标准曲线和样品稀释液测量值🐘_🦀，来计算待测样品的浓度😒——|☘️🌔。
若细胞上清样本🌨🐁|😓，建议用细胞培养基梯度稀释标准品*👻|♥。（2）耗材准备🌲_|😗🐚：准备8个1.5Ml离心管🦕——🎫，写上S1-S7🦛——|🌈、空白🦝🦠||*🦈。（3）梯度稀释🦝🐂-😠：根据说明书🐳——🌵，每管加入等体积的标准品稀释液（培养基）😻*-|🐸。吸取同体积溶解好的标准品到S1管中🎄🐝——_🪲，吹打10次混匀🐵🌲|*，涡旋5S🐆🤐-——🦛🎑。从S1管中吸取同体积溶液到S2管🦁🦑--🐚🌳，吹打10次混匀🥈🍀——🍂，涡旋5s🐒🌔|🤐🦮。
您好,请问Elisa用来封闭的脱脂奶是否可以做冻干保护剂?O(∩_∩)O谢...
可以🎏🐌-🙄🦠，我们实验室活的冻干疫苗就用过牛奶做为冻干剂🐀😮——🐦🏐。保护剂可改变生物样品冷冻干燥时的物理🦔🦚——-🐲、化学环境🐓——🌾🦤，减轻或防止冷冻干燥或复水对细胞的损害🐿|🐟🌿，尽可能保持原有的各种生理生化特性和生物活性🧧-😘；冻干保护剂不仅影响冻干过程中的细胞存活率🦩——_🐕🐯，还影响到保藏期间蛋白质及细胞的稳定性😇|🦂🦚。常用保护剂有糖类🐜-_*🧨、白蛋白🎄🌹——_🐟、..
第一个问题是对的😜🐥--🧩。至于你的第二个问题🤪🧵|🌾，你说还准备了一个0浓度的标准品溶液作为对照对吧🤖——🦫，可是你没说放了多少标准品🤠🦌--🐖🐳，那我们怎么会知道要放多少稀释液啊😋-🐚。
做ELISA的关键步骤是什么??？
ELISA关键是订一个可靠的试剂盒🌵——🦬😓。如果盒子已经订了🌲_🏸💐，剩下的就是自己操作了🐲🪢_|🐲。一个🦀🐈⬛_🥀，尽量用八道或者十二道移液器加样🦉😂——😰。对于相同的试剂🪆_🌔，经如二抗🎋🌷-😨，酶😸🦆——😪🦡，显色液🐕🏸-🙂，终止液等🐑🎾——_🌨。另一个🎇🪆__🦎，自己的样品🐄-|🌔，因为每一孔的样品不一样🐞🦗-|🙃♟，用排枪加有些麻烦🎉-——🎨🦔，如果一次的样品比较少😂🐈⬛_🦀💫，而自己加样又比较快😀|✨🍀，可以一个孔一后面会介绍🌜🌴-☹️。
方法一💀|_🎲🪄：用于检测未知抗原的双抗体夹心法🍃🍄——_💫：1.包被🐋🐃——🐪：用0.05M PH9🤧🌵--🏉🦁，碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml🃏🙉__🌿🐸，在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml🐅_——🦙，4℃过夜😂_——🐘☀️。次日🐈⬛-_🍃，弃去孔内溶液♦__🙄，用洗涤缓冲液洗3次🦌_|🦉，每次3分钟🦑😓————🐵🐭。2.加样☀️|🌑：加一定稀释🦈|-🤨😼。
ELISA试剂盒可以用来做WESTERN吗?？
虽然都是免疫学的东东🛷|🐊，但基本是没戏了🦨|🦛😗。什么试剂都不能用🌕🦇_🐽。ELISA试剂盒里面的试剂🕹🌲——😑，无论是标准品抗原还是抗体*-🐗，浓度都很低🤯-🎣。做WESTERN根本不够🐪🌿——🐋。你可以看一看别家抗体做WESTERN与做ELISA时的稀释倍数🐍🐄_🎄😓。当然🏑♣-🦑，如果ELISA试剂盒里面的抗体提供的是浓缩液🦈_|😜🥇，也许可以做一小片膜😅|_🐍。另一个🎆💐——🌳🎄，抗体是否有通用性有帮助请点赞🥋🧧_|🐾🤤。
在ELISA实验结束后🐙|🕸🤐，我们得到的是经酶标仪得出的标准品以及样本的OD值🦇🎋——*。其中😐_🦌😷，标准品的浓度已知🐺_🐵🎳，我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度🐺🦔||🌻，以OD值为横坐标🐳🏑-🎽，浓度为纵坐标🌚🦊——*，做一条标准曲线🏅_🎖，并用公式表示出来🐄😐——🦜🐀。这样🤩——🪳，我们把样本的OD值以X值代入🪳|_🎆，便可求出Y值😀--🐇😎，即样本浓度🐇🐔|_🐄♣。下面我们就一步步来实现这个是什么🐐——😉🐲。