MTT实验前期细胞密度如何确定怎么计算药物浓度
MTT实验前期细胞密度如何确定,怎么计算药物浓度?？
通常🎐🎍_🐡，此法中的MTT 浓度为5mg/ml🌔🤓——🌧。因此😦_——😿*，可以称取MTT 0.5克🌈——☺️，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中🎆——-💀，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌🧐||🐇，放4℃ 避光保存即可✨-——🧸。在配制和保存的过程中🃏-😿，容器最好用铝箔纸包住🤪——-😝。需要注意的是🐸😔|🥊，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力🖼_🐍，但不能测定细还有呢？
在进行MTT实验前⭐️|⛅️，首先要明确几个关键问题🦅☹️_-🦉：选择细胞接种浓度🌱🤬-🍁🐰：确保每孔接种适量细胞🦅🤒|🐥⚡️，一般96孔培养板满载时约有105个细胞🌦🏐——🧸，但需根据细胞贴壁率🦠🤗|🦀、增殖速度调整🏅||*🎎，保证线性关系👺🐳|⭐️。药物浓度设定**__😖：参考文献并进行初步筛选🐨😞_——🧶，再根据结果缩小范围进行细筛🐗🦂——🪀，避免使用无效浓度和时间🐉|——🧸🏈。时间点设定🐾🦙-🌺🤗：通过测量不同时间点的OD等会说🎫🐸|😷。
通常🎐🎍_🐡，此法中的MTT 浓度为5mg/ml🌔🤓——🌧。因此😦_——😿*，可以称取MTT 0.5克🌈——☺️，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中🎆——-💀，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌🧐||🐇，放4℃ 避光保存即可✨-——🧸。在配制和保存的过程中🃏-😿，容器最好用铝箔纸包住🤪——-😝。需要注意的是🐸😔|🥊，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力🖼_🐍，但不能测定细还有呢？
在进行MTT实验前⭐️|⛅️，首先要明确几个关键问题🦅☹️_-🦉：选择细胞接种浓度🌱🤬-🍁🐰：确保每孔接种适量细胞🦅🤒|🐥⚡️，一般96孔培养板满载时约有105个细胞🌦🏐——🧸，但需根据细胞贴壁率🦠🤗|🦀、增殖速度调整🏅||*🎎，保证线性关系👺🐳|⭐️。药物浓度设定**__😖：参考文献并进行初步筛选🐨😞_——🧶，再根据结果缩小范围进行细筛🐗🦂——🪀，避免使用无效浓度和时间🐉|——🧸🏈。时间点设定🐾🦙-🌺🤗：通过测量不同时间点的OD等会说🎫🐸|😷。
处于对数生长期的细胞对药物是最敏感的☺️😔|-☀️，而对数生长期的细胞就是似满非满🐭🦥|-🌾，长得太满的细胞肯定已过对数生长期🎫——😯，你要对接种的细胞浓度摸索一下🌾__🐤🌥，细胞生长的速度与达到对数生长期的时间有关🙊--🥅，不同浓度达到对数生长期的时间不同😃|——🖼🐔，也就是说😵||🤪，你用药的时间与接种的细胞浓度有关🦒——🙀🙊。另外🦁-|🌤🐨，及时给细胞换液🦠🐇————😙，对到此结束了？🦍——😚😸。
如果细胞生长良好25000-30000就可以🌜*|😲，你的接种密度不算太高我养的悬浮细胞在密度为40000的时候🦎🐋_-🤿，测出的OD值太高🙁-_🐡🤿，
IL-2活性测定问题?？
1.选择适当的细胞接种浓度🐚-|🌱。一般情况下😔——-🦬，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞⛈_🎉🕷。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大🙂——🍀，因此🪰————🎏😘，在进行MTT试验前🐘*——♥，要进行预实验检测其贴壁率🐗🌝|-🦤🤠、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线🐲🦁|——🐗，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间😋🎗-_😬😳，以保证培养终止致细胞过满🧩😲-😘🦂。这样🙂-😅，才能保证MTT结晶形成好了吧*-⚡️！
MTT是测试细胞数量和活度的方法*_|🐦。我觉得你可能在控制细胞数量的时候没有做到等同*-|🌴🎟，因为很多操作上的因素会影响🏵||🏸。比如⛈🦐——✨🐾，你操作时间太长会让大量的细胞贴壁🧧__😦🤐，而你还认为细胞密度是一样的🐒🌛||🦫，就会使后面加到的样品细胞数量减少🍃——-🔮。所以我建议你看看细胞数量上的问题🐼🎲————🌤。当然🐀——☺️，也不排除染菌了💐🐁_😈🐼。其实相当于变相增加细胞希望你能满意🐸——🐆。
mtt的实验方法?？
但由于不同细胞贴壁后面积差异很大🐞-🪳，因此🍂_🐑，在进行MTT试验前🦊——|🐤，要进行预实验检测其贴壁率😳🐃——|🕷🎮、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线🥀🌘|🦉🐫，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间😌😗-|🌦🐔，以保证培养终止致细胞过满🐍🙃——🍃。这样☁️————*🏅，才能保证MTT结晶形成数量与细胞数呈的线性关系🌾🤯-🦊。否则细胞数太多敏感性降低🕸🏑_|🎆😕，太少观察不到差异🦟😽|——🌗。⒉药物浓度的设定等会说🦆🦝_——🐭😪。