BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
bca蛋白定量步骤?？
实验操作具体步骤1. 梯度稀释牛血清白蛋白（BSA）标准品（具体操作按试剂盒中说明操作）2. 制备BCA 工作液（具体操作按说明书进行）3. 将各个稀释浓度的蛋白质标准品和待测蛋白质样品加入到微孔板或试管中🦝🐂_🦟，分别加入BCA 工作液（比例参照试剂盒说明书）混匀🦏_🐄。4. 密封后🎲😫|——🌴，37℃ 保温30-60 min 后面会介绍🌪-|🎯。
实验准备1.BCA定量试剂盒😛——🎏：含A液和B液A液🌘||🐾：BCA碱性溶液（配方🕸☘_*❄：1%BCA二钠盐🎆-——🐃，0.4%氢氧化钠🐌🤨-|🐦，0.16%酒石酸钠🐉||🎋，2%无水碳酸钠🐬————🍀🦦，0.95%碳酸氢钠😎--🤕，这些液体混合后再调PH至11.25）B液🦦🧸-🪆：4%硫酸铜2.牛蛋白血清（BSA）3.待测的蛋白样品实验步骤1.配置BCA工作液😇-|🦄：将A液和B液摇晃混匀🐏🦁——|🦀🦂，按照A:B=5是什么🛷-☄️。
实验操作具体步骤1. 梯度稀释牛血清白蛋白（BSA）标准品（具体操作按试剂盒中说明操作）2. 制备BCA 工作液（具体操作按说明书进行）3. 将各个稀释浓度的蛋白质标准品和待测蛋白质样品加入到微孔板或试管中🦝🐂_🦟，分别加入BCA 工作液（比例参照试剂盒说明书）混匀🦏_🐄。4. 密封后🎲😫|——🌴，37℃ 保温30-60 min 后面会介绍🌪-|🎯。
实验准备1.BCA定量试剂盒😛——🎏：含A液和B液A液🌘||🐾：BCA碱性溶液（配方🕸☘_*❄：1%BCA二钠盐🎆-——🐃，0.4%氢氧化钠🐌🤨-|🐦，0.16%酒石酸钠🐉||🎋，2%无水碳酸钠🐬————🍀🦦，0.95%碳酸氢钠😎--🤕，这些液体混合后再调PH至11.25）B液🦦🧸-🪆：4%硫酸铜2.牛蛋白血清（BSA）3.待测的蛋白样品实验步骤1.配置BCA工作液😇-|🦄：将A液和B液摇晃混匀🐏🦁——|🦀🦂，按照A:B=5是什么🛷-☄️。
BCA蛋白定量试剂盒（BCA Protein Assay Kit）是进行蛋白质浓度测定的最常见的方法之一😑-🏑。BCA蛋白定量的主要原理是🐑🐙_|🐋😍：蛋白质在碱性条件下🙄|🐺🐄，可以将二价Cu2+离子还原成一价Cu+离子🥏🐰-🎲。产生的一价Cu+离子可以与BCA（Bicinchoninic acid）试剂结合😾_🐔，最终生成紫色的复合物⚡️|-🦈。该复合物在562 nm处有很强的吸收峰🦕🐙-💀😣。复合等会说🐲|😟🧿。
蛋白质定量BCA法是一种常用的蛋白质测定方法😧🐕🦺|——🧧，全称为Bicinchoninic Acid Assay🐕-_♠，简称BCA法🙂🐆_——🦚*。该方法利用双缩脲反应来测定蛋白质浓度🐔-⭐️🦐，具有较高的灵敏度和准确性🐟——-🐩。BCA法的原理是蛋白质中的肽键与铜离子（Cu²⁺）可以发生双缩脲反应🧶————🐕，生成可溶性的络合物🎈*——-🌍🦏。在这个反应中🐖-🦐😑，蛋白质浓度与络合物的形成后面会介绍🦠*|🐯🏑。
BCA法蛋白质定量,简便灵敏?？
比色皿法虽然需要100μL的蛋白样品🦏-|🦅🦃，但1:20（v/v）的工作液比例确保了干扰物质影响降至最低🐷——🐦🌱。微孔板法则更加轻巧🐾😩——🐏😥，只需10-25μL的样品🐹🌔_|🎋*，操作起来如行云流水🏐——-🪅。然而🦕_-🌳☁️，尽管1:8（v/v）的比例对某些干扰物质有所限制🍀_🦏🦓，Abbkine的BCA蛋白定量试剂盒#KTD3001系列以其卓越性能🎍💐_🪶，依然提供三种规格供选择😳🦆|🦐🥇，满足后面会介绍🌏🤧_🌚。
此匀浆器的盖子或芯通常置于-20℃,使用时取出🎽_🐦🙄，操作应快捷🥀🐪|🦠🌈，匀浆1min基本可保持温度🏸--🌑😺。4.将匀浆加入90ul现配的裂解液中🤡|🤭🤥，冰上摇床裂解30min🐵-🦌。我采用的是***公司的BCA蛋白定量试剂盒测定提取蛋白浓度🦑🐥__😠，和说明书protocol差别不大🌦————🐌💫，稍有不同*🌖_-🐽，如下🌙-🐏🐾： 1.稀释BSA标准品以制作标准曲线🤯🐳|-🌤🦉：取7支EP管🦌🎱-*🦌，每管加30ul生理盐水🎫🌨-🐡，到此结束了？🌹🤧|👹。
BCA蛋白定量和 Bradford法蛋白定量有哪些区别?？
一😦🙄|🎗🏈、原理不同BCA蛋白定量🦇-😉🥈：碱性条件下🦨*|🎽🎣，蛋白将Cu2+还原为Cu+🐾🐵|_*，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物🧵*_-🦣，吸光强度与蛋白浓度成正比🐚-_🐽✨。测定其在562nm处的吸收值🐌-😁，并与标准曲线对比🙃🐑|-🧨，即可计算待测蛋白的浓度🪰_😍🤐。Bradford法蛋白定量🐑-——🤯🎭：在一定的浓度范围内🤔_|⭐️，蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成等我继续说🦖_☀️。
bca法标准曲线公式🎋——-🐱😫：z=(sin(3.5*theta-90))+24*t🐊🐌|_🏉😃。用标准的已知浓度的BSA溶液配几管不同浓度的🐉🐺——|😠，然后在分光光度计上测出来🤕——|🥌😱，把读数跟已知的浓度做一个曲线（有可能是直线）*——🧵，这就是标准曲线然后再测你的目标样品的浓度😚🦅_——⛅️，用读数在标准曲线上找到对应的真实浓度🧵|😩。
蛋白定量 bca 需要裂解细胞吗?？
本品是一种传统的细胞组织快速裂解液.使用本品裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western🌱|😲、IP 等.主要成分为50mM Tris (pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.1% SDS. 使用本品裂解得到的蛋白样品🐂_🎏，可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度.由于含有较高浓度的去垢剂🐡|_🎖⛸，不能用Bradford 法测定由本裂解液是什么😠——_🦆🦌。
我现在用的就是博凌科为的🏐🕷——🌤⛅️。BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是在世界上常用的蛋白浓度检测方法之一BCA法基础上改进而成🌷|——🦡*。众所周知*🎫_——😿，二价铜离子在碱性的条件下🐔_🌴🦊，可以被蛋白质还原成一价铜离子（biuret reaction）🦆——_⛸🦗，一价铜离子和独特的BCA Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应🐑_-🦥😧。两好了吧🐃|-🐆🐹！