当前位置 > 克隆的一般步骤克隆的一般步骤有哪些
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克隆子的获取步骤?
步骤(1)DNA片段的制备:常用以下方法获得DNA片段:①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段;②用物理方法(如超声波... 质粒型载体一般只能携带10kb以下的DNA片段,适用于构建原核生物基因文库,cDNA库和次级克隆。 ②噬菌体DNA:常用的λ噬菌体的DNA是双...
2024-08-21 网络 更多内容 598 ℃ 760 -
单细胞克隆实验步骤?
实验流程 A.平板克隆形成实验:适用于贴壁生长的细胞。 1. 取对数生长期的各组细胞,制备细胞悬液。 2. 将细胞悬液作梯度倍数稀释,分别接种含培养液的皿中,培养23周。 3. 经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养。 4. 弃去上清液,4%多聚甲醛固定,GIMSA染色液染1030 m...
2024-08-21 网络 更多内容 598 ℃ 885 -
请教高手:克隆基因的步骤
选择目的基因,并设计相应引物; 用引物PCR扩增目的基因片段; 选择合适(抗性标记、酶切位点等)的克隆载体(为了保真扩增),并将PCR片段连接入克隆载体中;(一般用Taq酶的PCR产物在末尾会自带一个A,可在Solution 1作用下与两端各带一个T的线性T载体直接相连) 将连接产物转化入感...
2024-08-21 网络 更多内容 654 ℃ 353 -
手机克隆步骤
由于手机克隆需要传输不同的数据,因此首先需要获取读取这些数据的权限。手机克隆完成后,旧手机中的资料会保持不变。手机克隆步骤安卓手机克隆到华为手机新手机打开手机克隆软件,选择这是新手机 > 其他安卓,进入连接旧手机页面,如下图:旧手机打开手机克隆软件,选择这是旧手机...
2024-08-21 网络 更多内容 749 ℃ 393 -
分子克隆步骤
通常重组分子的转化效率比非重组DNA低,原因是连接效率不高,有许多DNA分子无转化能力,而且重组后的DNA分子比原载体DNA分子大,转化困难。②转导,病毒类侵染宿主菌的过程称为转导,一般转导的效率比转化高。 (5)克隆的选择: ①直接筛选:有些载体带有可辨认的遗传标记,能有效...
2024-08-21 网络 更多内容 789 ℃ 283 -
淀粉酶基因克隆的步骤
在仔猪结肠内容物中分离出一株能利用淀粉的芽孢杆菌Bacillus sp. WS06, 构建了全基因组DNA文库,从中筛选出α淀粉酶基因amyF,分析测定了其核苷酸序列并进行了表达;其中amyF编码的蛋白有526个氨基酸、分子量为 58.6kD;它与已报道的Bacillus megaterium的α淀粉酶序列有93%...
2024-08-21 网络 更多内容 568 ℃ 653 -
DNA克隆步骤不包括
B[解答 应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质——同源或异源、原核或真核、天然或人工的DNA与载体DNA相结合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子,继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子,即DN...
2024-08-21 网络 更多内容 597 ℃ 644 -
基因克隆的基本步骤有哪些
基因克隆的基本步骤流程如下:一、目的DNA片段的获得:DNA克隆的第一步是获得包含目的基因在内的一群DNA分子,这些DNA分子或来自于目的生物基因组DNA或来自目的细胞mRNA逆转录合成的双链 cDNA分子。由于基因组DNA较大,不利于克隆,因此有必要将其处理成适合克隆的D...
2024-08-21 网络 更多内容 806 ℃ 323 -
单克隆抗体的制备步骤
一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化:在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备:单克隆抗体的大量制备主要...
2024-08-21 网络 更多内容 340 ℃ 62 -
2024-08-21 网络 更多内容 943 ℃ 501
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