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pcr扩增到200bp可以选择单向吗
PCR扩增200bp以上长度的片段时,最佳的方法是选择单向PCR或旋转逆转录-PCR(RT-PCR)。这两种方法都可以实现全长的PCR扩增。单向PCR是一种修饰型PCR,可以直接扩增带有5'终头修饰和3'终头修饰的片段,可以使得100bp到400bp左右的片段在一次PCR循环中完成扩增。RT-P...
2024-08-15 网络 更多内容 670 ℃ 864 -
pcr扩增8000bp怎么办?
可以尝试Roche的长片断扩增pfu酶,当然可能会稍微贵点.一般的酶可能扩不了这么长. 我还有个方法就是,你的目的片断中找一个单酶切的位点把目的片断分为两段扩增,再分两次连到载体中,这样会好扩增得.
2024-08-15 网络 更多内容 514 ℃ 617 -
ndapcr扩增后的bp数比mrnapcr扩增后多吗
同起始量pcr扩增浓相差 基表达水平般通该基转录mRNA少衡量PCR通产量寡判断普通PCR般能定性判断基表达量实荧光定量PCR通PCR扩增定量计算RNA含量(通比较内参ct值)所传统曲线能定性判断实荧光定量PCR曲线定性判断 基扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain rea...
2024-08-15 网络 更多内容 839 ℃ 139 -
PCR扩增的常见问题
Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特 异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。 反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测...
2024-08-15 网络 更多内容 112 ℃ 281 -
pcr扩增效率怎么算
在网上搜到了两个计算realtime PCR扩增效率的公式,但相互不同,不知哪个才是正确的。请大家明辨! 第一种计算: 第二种计算方法:两个都是通过标准曲线法计算扩增效率,其实是一样的,按照定义理解,完全扩增的话1条变2条,2条变4条,扩增效率200%,但一般通过软件计算都是提供第...
2024-08-15 网络 更多内容 384 ℃ 726 -
pcr扩增的原理和步骤
实验方法原理①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应做准备; ②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互...
2024-08-15 网络 更多内容 243 ℃ 120 -
pcr扩增的原理
PCR扩增的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 PCR是一种体外DNA扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性...
2024-08-15 网络 更多内容 540 ℃ 584 -
PCR扩增目的基因大小为2500bp,但琼脂糖凝胶电泳检测发现没有扩增...
麻烦提供更多信息,按照你目前的情况分析有以下几个原因:1、原因分析:1)引物特异性不好,不能有效扩增目的片段。2)PCR程序设置有问题,95℃ 10min,中间加上循环程序就可以了,根据扩增酶的特性进行设计 &...
2024-08-15 网络 更多内容 619 ℃ 595 -
pcr扩增效率怎么算
在网上搜到了两个计算realtime PCR扩增效率的公式,但相互不同,不知哪个才是正确的。请大家明辨! 第一种计算: 第二种计算方法:两个都是通过标准曲线法计算扩增效率,其实是一样的,按照定义理解,完全扩增的话1条变2条,2条变4条,扩增效率200%,但一般通过软件计算都是提供第...
2024-08-15 网络 更多内容 712 ℃ 860 -
如何理解pcr扩增的原理和过程
PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性退火延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成...
2024-08-15 网络 更多内容 344 ℃ 862
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