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  做SOE PCR

  重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。可以有三种方法来设计引物,具体如下图所示。引物F及R为基因两端特异引物,其中Fm及Rm为中间引物。其中引物Fm及Rm中间共享一段序列(至少10bp完全匹配,否则后续实验很难成功),突变点可以设计在Fm或Rm,也可以两条引物...

  2024-07-21 网络 更多内容 456 ℃ 79
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  含目的基因的质粒的pcr

  第一个办法 ,如果你有这个载体的通用引物,可以用这俩通用引物做PCR,然后电泳观察条带的大小,如果条带和你的mRNA的大小相近(应该是略大于mRNA的,因为带有了小部分的载体序列),那就说明这里边是插入目的基因的. 第二个办法,如果你能知道这个基因插入位点的酶切位点是什么...

  2024-07-21 网络 更多内容 942 ℃ 139
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  cre 转基因小鼠

  cre小鼠就是我们常用的带有不同的cre酶的工具鼠统称,cre指的就是cre酶。Cre/loxP重组酶系统,指的是条件性基因打靶、诱导性基因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心,在新型基因打靶中获得广泛应用,是由Sternberg和Hamilton提出。需要此类实验鼠的可以联系赛业生物。赛业...

  2024-07-21 网络 更多内容 751 ℃ 357
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  pcr

  先blast一下,引物特异性不好再改变条件也没意义引物GC% 5‘端或中间高3’低,3’端5个碱基内尽量不要有连在一起的CG且少于3个。引物不要在串联重复区,比如Alu上如果引物没有问题,可以减少引物浓度(100nM),酶的的用量(1U/50ul),增加模板和提高退火温度退火温度最好在设计时...

  2024-07-21 网络 更多内容 891 ℃ 848
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  PCR

  镁离子浓度一般用量1.52.0 mmol/L,Taq DNA聚合酶活性需要Mg 2+。Mg 2+浓度过低,会显著降低酶活性。Mg 2+浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强。Mg 2+浓度还会影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度,从而影响扩增片段的产率。 Takara的mg离子的浓度一般是25mM的,2...

  2024-07-21 网络 更多内容 186 ℃ 144
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  PCR

  PCR:聚合酶链式反应,是经过循环式温度变化而实现体外循环扩增DNA片段的技术。

  2024-07-21 网络 更多内容 112 ℃ 327
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  pcr

  因为引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补;另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3端开始合成新的核酸链。引物序列的 GC 含量一般为 4060%,过高或过低都不利...

  2024-07-21 网络 更多内容 565 ℃ 943
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  PCR

  #多聚酶链式反应,是一种快速的DNA特定片段体外合成扩增的方法。它的反应过程包括高温变性、低温退火和中温延伸三个过程。

  2024-07-21 网络 更多内容 403 ℃ 96
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  高中生物:基因工程之PCR

  首先你要明确一个概念,在生物体内复制时,DNA的引物是一小段RNA,这=一=段引物是要被切掉的。 但是在体外pcr扩增时,所用的引物是一段短的DNA,这=一=段是不会被切掉的。 生物体内的RNA引物被切掉以后,DNA聚合酶会在切口处补上,所以也不会空缺。

  2024-07-21 网络 更多内容 990 ℃ 780
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  什么叫primerless PCR

  问题补充:利用错配pcr增加抗体亲和力的主要原理是什么? 列两篇相关文章的摘要,主要还是筛选抗体库。类似于进化论中的突变随机选择定向(如需要原文请

  2024-07-21 网络 更多内容 490 ℃ 175